实验01-02有丝分裂与多倍体汇总.pptVIP

遗传学实验一 植物根尖细胞有丝分裂观察 与 多倍体细胞的人工诱导 2013-09-12 教材：实验28+32 基础知识回顾 染色质（chromatin）: 在真核生物间期细胞核内，以双链DNA分子为骨架，结合组蛋白和非组蛋白及少量RNA所组成的稳定成分，易被碱性染料着色的一种无定形物质。染色质的形态在细胞分裂的间期是由染色质丝组成的网状结构。 染色体（chromosome）: 在细胞分裂时期，染色质丝经过多级螺旋化形成一种具有固定形态结构的染色体。 染色质和染色体是同一物质不同时期的名称。 基础知识回顾 基础知识回顾 基础知识回顾 有丝分裂末期胞质分裂时形成收缩环 基础知识回顾 基础知识回顾 Part I 洋葱根尖细胞有丝分裂观察 一、目的和要求 1、通过对植物根尖细胞有丝分裂染色体的制片和观察, 初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法。 2、了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。 二、实验原理： 有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主要方式。在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的。 各种生长旺盛的植物组织均存在着有丝分裂。植物根尖是有丝分裂最旺盛的部位，把根尖经过固定，染色和压片处理后，在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。 Part I 洋葱根尖细胞有丝分裂观察 三、材料、器具和试剂 1．材料：洋葱根尖 2．器具：载玻片、盖玻片、显微镜、镊子、滴管、吸水纸、小烧杯、水浴锅、纱布 3．药品：改良苯酚品红染液、1M HCl Part I 洋葱根尖细胞有丝分裂观察 四、实验步骤： 1．根尖培养及前处理（王老师帮忙完成）： 洋葱鳞基置于盛水的小烧杯上，25oC培养箱中培养，根长到2cm左右时，上午九时（分裂高峰期），剪取根尖，立即放在卡诺固定液中固定24小时，转入70%的酒精中，4oC保存。 Part I 洋葱根尖细胞有丝分裂观察 2．解离： 固定好的根尖，蒸馏水漂洗，放在1M HCl中，60oC水浴解离8-10分钟，蒸馏水漂洗。 3．染色： 取一根尖置于载玻片上，用解剖针把根冠及延长区截去（也可保留），滴加改良苯酚品红染液1-2滴，染色约10分钟。 Part I 洋葱根尖细胞有丝分裂观察 4．压片： 根尖着色后(加盖片，用滤纸条在盖片处绕载玻片紧紧缠绕起来，大拇指轻按，再用铅笔的橡皮头适当用力敲打盖片，使染色体渐渐分散，去除滤纸条，吸干多余的染液。 5. 镜检： 观察有丝分裂各期染色体。（观察时先在低倍镜下找到分裂相，再用高倍镜观察） Part I 洋葱根尖细胞有丝分裂观察 实验要求： 看到所有的有丝分裂时期的染色体分布形态，绘出所观察到的分裂相，并注明时期（也可拍照打印）。 Part I 洋葱根尖细胞有丝分裂观察 一、目的和要求： 了解人工诱导多倍体的原理，并初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法。 二、实验原理： 多倍体是指细胞内有三套或三套以上染色体组的生物体。多倍体广泛存在子植物界，有同源多倍体，也有异源多倍体。除了自然界中存在的多倍体外，还可以人工诱发多倍体，其中秋水仙素是效果最好的诱发剂。 秋水仙素作用机理是抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使复制后的染色体不能拉向两极，细胞不能继续分裂，从而导致染色体加倍，形成多倍体细胞。 Part II 植物多倍体细胞的人工诱导 1．材料： 洋葱或大蒜； 2．器具： 显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、镊子、刀片、滴管、吸水纸； 3．药品： 0.1%和0.025%秋水仙素溶液，1M HCl，改良品红染液。 Part II 植物多倍体细胞的人工诱导 1、培养：剪去老根，置于盛水的瓷盘中，当长出新的不定根后，用秋水仙素处理（王老师完成）； 2、秋水仙素处理：把长出幼根的大蒜移到０.01%-0.1%盛有秋水仙素溶液的瓷盘中，使植物根部浸在药液中，根尖朝下，25oC条件下处理，直到根尖明显膨大为止（王老师完成） ； 3、固定：剪下根部，用卡诺固定液固定１小时（王老师完成）； 4、解离：取出固定好的根尖，水漂洗２－３次，放在1MHC中，60oC水浴解离8-10分钟，蒸馏水漂洗。 5、染色：取一根尖置于载玻片上，滴改良品红染液1-2滴，染色8-10分钟。 6、压片：用解剖针把根冠及延长区截去，加盖片进行压片。 7、镜检：在显微镜下观察多倍体细胞的染色体数目。 Part II 植物多倍体细胞的人工诱导 Part II 植物多