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不同浓度胎牛血清对细胞老化影响 主讲人 :刘安进 指导教师:韩英浩 论文章节 一 概述 衰老是每个人无法避免的事情,我们能做的就是尽可能减缓衰老的发生。基于这个想法我们开始了细胞衰老的研究。 背景 二 活性氧与细胞器官老化的关系 活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS)是指化学性质活跃的含氧原子或原子团 。 活性氧可以引起细胞老化的产生。在各组织器官中发生相应的组织器官老化。 1 细胞复苏 2 细胞传代 3 梯度浓度血清培养并染色 五 实验结果 实验结论 结论: 细胞老化与血清饥饿的关系:血清饥饿可以引起活性氧的升高,导致细胞老化的增加,但是在短时间的饥饿会使细胞的代谢率下降,产生的ROS会随着血清浓度的降低而降低,从而使老化的细胞的减少。所以适当的节食会延缓衰老的速度。 结束! * 二 活性氧与细胞器官老化的关系 一 概述 三 实验研究目的和内容 四 实验方法 五 实验结果 细胞饥饿时可以产生活性氧, 对细胞产生毒化作用。本实验以细胞饥饿为变量,细胞饥饿引起细胞衰老,细胞衰老的程度越高细胞内半乳糖苷酶含量越高。在pH6.0的条件下以X-Gal为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物。 实验原理 三 实验目的和内容 实验目的:验证血清饥饿可引起细胞衰老。但短时间内细胞饥饿会减缓细胞衰老。 实验内容:用梯度浓度胎牛血清进行细胞传代培养,并得出细胞老化结果。 细胞培养液在37℃条件下水浴20分钟 1000r ,20 ℃离心3分钟 吸除上清液,留下沉淀,加入6ml 培养液,并用移液枪将其混合均匀 将混匀的6ml培养液转入到平皿中 再加入4ml培养液,并放入恒温箱中培养 四 实验方法 1000r ,20 ℃离心3分钟 c 加入1mlTE 混匀 培养箱中培养2分钟 b HBSS冲洗 a 吸除培养液 a 将培养皿中细胞液转入table 中 b 再加入9ml培养液于管中 a 弃上清,留下沉淀,加入6ml 培养液,并用移液枪将其混合均匀 b 将混匀的细胞液转入平皿中 转入细胞液之前,皿中先转入培养液4ml 平皿液体混匀,放进恒温箱 按一定倍数稀释细胞 10% 10% 3.0% 3.0% 3.0% 10% 3.0% 3.0% 3.0% 3.0% 3.0% 3.0% 10% 10% 10% 05% 0.5% 0.5% 0.5% 0.5% 0.5% 0.5% 0.5% 0.5% a 吸出各孔中的培养液 b 用HBSS清洗 每孔2ml 时间为5分钟 c 药品处理 每孔0.5ml 处理16h后才能观察 0.16 0.18 0.09 老 化 细 胞 比 例 0.19 0.15 0.056 0.19 0.12 0.07 0.21 0.15 0.1 平均老化率 10% 3% 0.50% 血清浓度 细胞老化数据图 0.00% 20.00% 40.00% 0.5% 3% 10% 血清浓度 细 胞 老 化 比 例 老化细胞
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