第2讲基因工程的主要技术概论.ppt

生物技术核心课程 A 重组DNA技术的理论基础 B 基因的分子生物学 C 基因工程的基本原理 第一讲 基因工程概论 第二讲 基因工程的主要技术 第三讲 基因工程的酶学基础 第四讲 基因克隆的载体与受体 第五讲 目的基因的克隆与分离 第六讲 克隆基因的检测与功能鉴定 第七讲 克隆基因的表达与产物纯化 第八讲 基因表达的调控 三篇重要论文 DNA双链非特异性内嵌染料（SYBR GreenⅠ）能特异性地结合到双链DNA上，而不结合到单链DNA上，并且结合后的染料的发光强度会明显增加，没有结合的染料在溶液中只能发出很微弱的荧光。 扩增序列特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的基因特异寡核苷酸探针来检测产物，它又可分为直接法和间接法。 间接法（双标记探针Taqman Probe） : PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团，此时5′端荧光基团吸收能量后将能量转移给临近的3′端荧光淬灭基团（发生荧光共振能量转移，FRET），因此探针完整时，检测不到该探针5′端荧光基团发出的荧光。Fluorescent probesFluorescent probes are pieces of DNA complimentary to your gene of interest t