动物源抗菌肽的研究现状和展望解析.docVIP

动物源抗菌肽的研究现状和 （浙江大学饲料科学研究所，生物饲料安全与污染防控国家工程实验室，动物分子营养学教育部重点实验室，动物营养与饲料农业部重点开放实验室 杭州 310058） 摘要：动物源抗菌肽是机体先天免疫系统的效应分子，因其具有广谱高效抗菌活性、及不易产生耐药性等特点，一直被认为是抗生素的替代品大量研究，抗菌肽不仅具有抗细菌、抗病毒、抗真菌、抗肿瘤等，抗炎症反应、招募细胞、促进损伤修复等作用。本动物源抗菌肽的生物学功能、作用机制、稳定性、表达规律、以及，为新型、高效、环保型抗生素替代品提供重要信息和策略。关键词：抗菌肽；；；；抗菌肽又名宿主防御肽，是机体抵抗外来致病菌侵袭的屏障。成熟抗菌肽一般包含12～100个氨基酸残基，由于其带正电荷、呈两亲性的分子结构，使得其便于与带负电荷的微生物膜或其他细胞靶点相互作用[1]。人们一直认为抗菌肽具有优点，然而随着对抗菌肽研究的深入，人们发现它并不是“万能的”，某些细菌仍然能对抗菌肽产生耐药性，而且抗菌肽对动物体内的益生菌也有一定的杀伤作用。另外，外源抗菌肽的吸收、在动物体内的稳定性以及与抗生素相互影响等都不甚明了。鉴于此，本文生物学功能作用机制、稳定性、表达规律以及动物源抗菌肽的研究现状作一系统阐述抗菌肽的生物学功能及作用机制 抗菌肽的抗菌功能与机制 [2]。 细菌、真菌和真核生物细胞膜是大多数抗菌肽作用的首要靶点。抗菌肽通常定位在细菌膜的表面，当肽浓度达到一定阈值时破坏细菌细胞膜[3]。而抗菌肽作用于微生物细胞膜包括非受体结合和受体结合2种机制。多数微生物外层带负电荷与阳离子抗菌肽非受体结合，有学者观察了10种不同动物源的抗菌肽对革兰氏阴性菌大肠杆菌（如ATCC25922）和革兰氏阳性菌（如ATCC25923）的作用机制，结果表明，大多数受试抗菌肽都能破坏细菌细胞膜，使其内容物泄漏，出现空泡化，此外还发现抗菌肽Protegrin-1(PG-1)具有胞内作用靶点，能够与细菌DNA结合，抑制蛋白质合成[4-5]。其他研究者也发现一些抗菌肽具有破膜机制和多种胞内作用机制，如Lv等[6]发现多种杂合肽透过细菌细胞膜，破坏膜完整性导致细菌死亡；Lan等[7]发现抗菌肽Gloverin能抑制RNA合成；Hwang等[8]、De Smet等[9]先后发现抗菌肽Indolicidin、PR39和Attacins能抑制蛋白质合成。 最新研究表明，抗菌肽的杀菌机制远非如此。Chu等[10]报道抗菌肽α-Defensin 6可以结合到细菌表面，自我组装形成一些小纤维和纳米样纤维包裹在鼠伤寒沙门氏菌周围，减少细菌黏附到肠道黏膜进而保护机体。本课题组也发现猪源hepcidin能够使大肠杆菌K88发生聚团，形成网状结构包裹。 1.2 抗菌肽的免疫调节作用与机制 抗菌肽在机体内的浓度低于2 μg/mL，远小于其杀菌浓度，但却可以在生理环境下调节免疫细胞功能。越来越多的研究表明免疫调节活性是抗菌肽发挥的主要生物学功能[11-12]。抗菌肽的免疫调节功能主要包括：调节机体炎症水平。抗菌肽发挥炎症调节功能依赖多种机制，如Niyonsaba[13]研究表明，人抗菌肽LL-37能抑制-(B（NF-(B）亚单位p65的移位激活MAPK）和PI3K）信号通路选择性上调抑炎因子的表达；Mookherjee[14]也发现LL-37通过与LPS）直接结合，从而抑制TLR）4及下游信号通路的激活等。同时降低LPS诱导的小鼠及人嗜中性粒细胞[14]、树突状细胞[15]和B淋巴细胞[11]的促炎因子的异常表达。通过诱导或增加趋化因子的分泌间接发挥趋化作用。Niyonsaba[13]研究发现，在低生理浓度下，抗菌肽能够诱发免疫细胞趋化因子的产生如人防御素可通过诱导肥大细胞脱粒和激活来招募中性粒细胞，进一步刺激支气管上皮细胞中IL-8）的转录和。在稍高生理浓度下，抗菌肽自身作为趋化因子，募集粒性白细胞到感染部位发挥先天和适应性免疫反应作用。如LL-37可以介导CXCR2受体和FPR2）增加钙离子流出，进而趋化外周血单核细胞和嗜中性粒细胞；Yang[16]和Zhang等[17]研究发现，LL-37同时通过激活FPR2诱导单核细胞的趋药性。相似的，hBD-2）、人β-防御素3（hBD-3）可以通过CCR2）趋化单核细胞启动和调节特异性免疫。若先天性免疫不足以消除感染，抗菌肽则通过信号传递途径动并扩大宿主的特异性免疫反应。Gracia等[18]研究结果表明，注射PTd）和抗菌肽HH2-CpG可以提高100倍IgG）的分泌水平提高免疫球蛋白亚型IgG2a和IgG1的抗体水平直接增强机体抗细菌感染能力Chromek等[19]和Nizet等[20]研究表明，CRAMP基因敲除小鼠在链球菌A的感染下更易导致皮肤坏死，并且更容易引起泌尿系统的感染通过特