基因表达的调控-8年制2015精要.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 谢谢大家！ 分子生物学研究中心 /mbrc/ * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * （1）启动子(promoter) RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，至少包括一个转录起始点以及一个以上的功能组件。 TATA盒 GC盒 CAAT盒 决定RNA聚合酶Ⅱ转录起始点和转录频率的一关键元件。 * ?①核心启动子(core promoter) ②上游启动子元件(upstream promoter element, UPE) 上游-25~-30bp处，又称TATA盒（TATAAAA） 上游-30~-120bp处，包括GC盒（GGGCGG）和 CAAT盒（GCCAAT） * TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 顺式作用元件 结构基因 -CAAT--GCGC----TATA 转录起始 真核生物启动子保守序列 * (2)增强子(enhancer) 指位于启动子上游或下游并通过启动子增强目标基因转录效率的DNA顺序，增强子本身不具备启动子活性。 位置距离及作用方向不固定 决定基因表达的时空特异性 * (3) 其他元件 a)沉默子（silencer） 指在真核基因内能抑制基因转录的DNA序列,与反式作用因子相互结合而起作用。不受距离和方向的限制，并可对异源基因的表达起作用。 b)加尾信号 * 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA * * 真核基因结构 * 3. 反式作用因子 指能直接或间接地识别或结合在各顺式作用元件8～12bp核心序列上，参与调控靶基因转录效率的一组蛋白质。 有时也称转录因子（transcription factor, TF）。 TFⅡD（TATA）、CTF（CAAT）、SP1（GGGCGG） * 反式作用因子根据作用方式分为三类： ①通用转录因子。普遍存在的转录因子。 ②组织特异性转录因子。与基因表达的组织特异性有很大关系。 ③诱导性反式作用因子。活性能被特异的诱导因子所诱导。 * 反式作用因子结构域的模式 DNA结合结构域 转录活化结构域 结构域 连接区（结合其他蛋白质的结构域） * （1）DNA结合域的结构模式 1）锌指结构 2）同源结构域 3）碱性亮氨酸拉链 5）碱性α-螺旋结构 4）螺旋-环-螺旋结构 * 1）锌指结构 配位键 2-9个 定义：是一种常出现在DNA结合蛋白中的结构基元。是由一个含有大约30个氨基酸的环和一个与环上的4个Cys或2个Cys和2个His配位的Zn构成，形成的结构像手指状。 * Cys2 / Cys2锌指 Cys2 / His2锌指 见于甾体激素受体 见于SP1，TF ⅢA等 * ②同源结构域（homeodomain，HD） 同源盒基因家族各基因间具有一相同的保守序列，称为同源结构域。所含的至少二个α螺旋中形成“转折”，第三个α螺旋与DNA大沟相互作用是同源盒蛋白与DNA结合的主要力量 。 * 3）碱性-亮氨酸拉链 二聚体 亮氨酸之间相互作用形成二聚体，形成“拉链” 。 肽链氨基端20～30个富含碱性氨基酸结构域与DNA结合。 * 4）碱性-螺旋-环-螺旋 * （2）转录活化结构域：转录激活区 1）酸性α-螺旋结构域 2）富含谷氨酰胺结构域 3）富含脯氨酰胺结构域 * 4. 转录水平的调控机制 1）反式作用因子的激活 1）表达式调节：反式因子合  成出来就具有活性 2）共价修饰调节： 磷酸化-去磷酸化，糖基化 3）配体结合 4）蛋白质与蛋白质相互作用 * 2）反式作用因子作用方式 连锁反应：转录因子与DNA结合后促 进另一转录因子的结合 DNA扭曲：改变DNA构型 滑 动：沿DNA滑动到另一特异  序列发挥作用 * Promoter Enhancer GENE DNA成环： 使相应位点接近而发挥作用 * Upstream enhancer Transcription initiation site Upstream promoter element 3）反式作用因子的组合式调控 * 三、转录后水平的调控 （一）5′端加帽和3′端多聚腺苷酸化 保护mRNA在转录过程中不被降解 （二）mRNA的选择性剪接 * 外显子与内含子的连接