SDS-PAGE电泳解析.pptVIP

SDS杨兵 主要内容： 一、SDS简介 二、实验试剂与器材 三、实验步骤 四、注意事项 一. SDS（简介） SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS） ： 什么是聚丙烯酰胺凝胶？ 加入SDS的作用？ SDS的用途？ SDS分离蛋白质的原理？ SDS的优缺点？ 垂直板电泳装置 样品迁移方向 加样 1.聚丙烯酰胺凝胶 聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(Acr)和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在加速剂N，N，N?，N?—四甲基乙二胺(TEMED)和催化剂过硫酸铵(AP)或核黄素的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶，以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳时，它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子大小和形状等因素。 当向蛋白质溶液中加入足够量SDS，由于十二烷基硫酸根带负电，使各种蛋白质—SDS复合物都带上相同密度的负电荷，它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量， 因而掩盖了不同种蛋白质间原有的电荷差别，SDS与蛋白质结合后，还可引起构象改变，蛋白质—SDS复合物形成近似“雪茄烟”形的长椭圆棒，不同蛋白质的SDS复合物的短轴长度都一样，SDS消去了蛋白质电泳时的电荷和分子大小的因素，使蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于它的分子量，而与所带电荷和形状无关。 2.加入SDS的作用： 3. SDS的用途： 主