HPLC使用指南解析.doc

HPLC使用指南 第一部分 使用前准备 1.????? 流动相 1.1? 常用的溶剂体系 1.1.1? 中性体系 甲醇-水 乙腈-水 异丙醇-水（质谱常用，HPLC使用较少） ? 1.1.2? 酸性体系 0.08% (v/v) TFA（三氟乙酸） in water - 0.08% (v/v) TFA in acetonitrile（乙腈） 0.1% (v/v) TFA in water - 0.1% (v/v) TFA in acetonitrile *HPLC常用的酸有：三氟乙酸，甲酸。 三氟乙酸：最常用。对体系（基线）的稳定性好。但配置好的流动相溶液不稳定，不能长时间放置。沸点低，容易除去。酸性较强。 甲酸：常用。沸点较低，较易除去。但对体系（基线）的稳定性较差。 **酸性体系会减少色谱柱的使用寿命。因此在使用不同的色谱柱之前，需要注意填料可耐受的酸碱度。一般C18的填料的耐受范围是pH3-8。 ? 1.1.3? 缓冲体系 0.05M TEAB（?溴化四乙 - acetonitrile 0.1M TEAB - acetonitrile *HPLC常用的缓冲溶液体系有：三乙胺-碳酸缓冲液 (TEAB)，三乙胺-醋酸缓冲液 (TEAA)，三乙胺-磷酸缓冲液 (TEAP) 三乙胺-碳酸缓冲液 (TEAB)：沸点较低，容易除去。常用。 三乙胺-醋酸缓冲液 (TEAA)：沸点较高