免疫检验的质量控制研讨.ppt

免疫检测与质量控制 概念—抗 原 概念--抗 体 ELISA试剂盒的组成 ELISA 操 作 要 点 分 析 前 质 控 分析前质控----试剂盒选择 分析前质控---仪器的质控 分 析 中 的 质 控 质 控 血 清 室内质量控制程序 免疫实验定量检测质控图 12s(1-2s)：一个质控测定值超过X±2s质控限。传统上，这是作为Levey-Jennings质控图上的 警告 限。 13s(1-3s)：一个质控测定值超过X±3s质控限。传统上，这是作为Levey-Jennings质控图上的 失控 限。 22s(2-2s)：两个连续的质控测定值同时超过X-2s 或X+2s质控限。 R4s(R-4s)：在同一批内高和低质控测定值之间的差值超过4s。 31s(3-1s)：三个连续的质控测定值同时超过X-1s 或X+1s。 41s(4-1s)：四个连续的质控测定值同时超过X-1s 或X+1s。 7X(7-X)：七个连续的质控测定值落在平均数（X）的同一侧。 7T(7-T)：七个连续的质控测定值呈现出向上或向下的趋势。 室 间 质 评 室间质评， 即室间质量评价简称，是由质控中心采用一系列的办法连续地、客观地评价各实验室的试验结果，并发现室内质控不易发现的不准确性，了解各实验室之间结果的差异，并帮助校正，使具有可比性。各实验室试验结果报到质控中心，经过统计分析，得出相互比较的结果。这种评价不能控制各实验室每天发出的检验报告，而是一种回顾性评价。室内质控主要监测试验结果的精密度，而室间质评主要控制试验结果的准确度，不能互相替代。参与质评的实验室应先做好室内质控。 免疫室的实验记录 1.实验室内环境信息 （温/温度记录） 2.试剂盒信息记录 （试剂盒货号、批号、有效期、新启用盒） 3.检测对象信息 4.实验设计/布局 5.实验步骤 （时间、温度、加样量） 6.结果 （样本结果、标曲、质控） 7.签名 （实验人员、记录人员、审核人员） 8.其它记录 结 果 处 理 1.空白值观察 2.绘制标曲 3.质控值观察 4.检测值分布情况 试剂盒接收与保存 1.核对货号、批号、有效期； 2.尽快分装标准品、质控品 后低温冷冻保存； 3.试剂盒按保存要求条件存放。 * * 抗原：抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。抗原进入机体后， 可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。在免疫测定中，抗原是指能与抗 体结合的物质。能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000的 蛋白质。 免疫测定：是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过 抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。 （酶联免疫检测是实验室较常用的检测方法） 半抗原：即小分子化合物在与大分子蛋白质结合后能引起机体产生特异性抗体的。例如某些激素、药物等。 抗原的反应性：取决于抗原决定簇或称为表位，一个抗原分子可带有 不同的决定簇。 单克隆抗体通常用抗原免疫小鼠制备。将免疫的脾细胞 （含产生抗体的B细胞）与小鼠肿瘤细胞融合，分离杂 交瘤细胞，接种于小鼠腹腔，产生的腹水中含有浓度很高 的单克隆抗体。 抗体：是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。 抗血清：含有抗体的血清称为抗血（antiserum）。免疫测定中所用的抗血清一般用抗原免疫兔、羊或马制得。 多抗：将多种抗原或含有多个抗原决定簇的抗原注入机体，则将由 多系的B细胞产生相应的多种抗体，这些抗体均存在于免疫血清中。 单抗：仅针对一种抗原决定簇，具有很高的特异性。 机体受抗原刺激后，B淋巴细胞产生相应的抗体。 （1）已包被抗原或抗体的固相载体；（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；（3）酶的底物；（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中）， 参考标准品和控制血清（定量测定中）；（5）酶结合物；（6）洗涤液；（7）酶反应终止液； （8）标本的稀释液 1.标本取材（新鲜，不能污染，保存温度） 2.试剂的准备（室温平衡，及时放回冰箱） 3.加样（样本、酶结合物、显色剂 加入底部，无气泡，无溅出） 4.孵育 5.洗涤 6.显色 7.比色 ◎检验项目的基本原理（实验 原理）；◎临床意义；◎熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点；◎熟悉检测试剂性能（包括试剂盒组成，包被片段及其组成）；◎ 熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数据处理的能力和质量控制知识。 灵敏度：1）为试剂检出被检物质的最低量的能力； 2）为试剂对人群或大量样品中阳性检出的能力 （假阴性越少越好），取决于包被物的全面性。 特异度：指试剂正确检定不存在的被检物质的能力 （无假阳性），取决于包被抗原（体）及标记抗原（体