实验一光学显微镜的操作及细菌，放线菌和.doc

目 录 前 言 2 微生物学实验室守则 4 实验一 光学显微镜的操作及细菌，放线菌等原核微生物个体形态的观察 5 实验二 酵母菌、霉菌、藻类、原生动物及微型后生动物 个体形态的观察与微生物细胞数的计数 11 实验三 微生物的染色 14 实验四 培养基的制备和灭菌 18 实验五 细菌纯种分离、培养和接种技术 25 实验六 自来水中细菌总数和大肠菌群数的测定 32 实验七 壳聚糖包埋活性污泥法污水处理新工艺 39 实验八 自然水体中动物病毒的培养和测定（空斑试验） 41 实验九 富营养化湖中藻类的测定（叶绿素a法） 44 实验十 嗜盐菌培养与菌紫质的提取与纯化 47 前 言 《环境微生物学》是在环境和环境工程事业蓬勃发展的基础上应运而生的一门微生物学的分支学科，主要讲述微生物学的部分基本知识，包括微生物的形态结构、生理、生长和繁殖、遗传与变异等；微生物的生态以及在自然界物质循环中的重要作用；环境工程中的污水及有机固体废弃物的生物处理原理；微生物在其他环境工程中的应用等知识。随着近年来环境科学和环境工程的飞速发展，微生物在环境保护和环境产业上显示出了越来越大的利用价值和广阔的应用前景，这就促使了《环境工程微生物学》内容的不断扩充与更新，《环境工程微生物学实验》作为环境工程微生物学重要的组成部分，也应进行内容上的更新和结构上的调整，在掌握基本操作技能的同时，加强对自主设计实验的要求。本实验讲义在符合教学大纲要求的基础上，参考有关教材和国内外资料，对实验内容进行了适当的调整，增加了部分实验内容和部分实验学时，使其更适合我校的办学特色和专业要求，具体实验内容可分为以下三个方面： 一、微生物学实验的基本操作和技能训练：如无菌操作技术、显微镜技术、微生物的分离与纯化技术，细菌染色，微生物测微和计数以及培养基制备等技术。其中一些最基本的内容在不同实验中可得到多次重复与强化，要求学生对这些基本训练能达到操作正确、运用熟练的要求。 二、为加深学生对理论部分的理解而设计的实验，如各类微生物形态观察，微生物生理生化测定，水的卫生细菌学等。 三、微生物菌种的分离、纯化、培养和保藏技术，学生学习后既可从环境中分离出微生物，并进行微生物的纯化，从中可筛出性状优良的菌株，并掌握菌株的培养条件和保藏条件。 四、考虑微生物学本身广泛的应用性及学生毕业后可能从事与环境工程微生物学有关的教学或工作需要，适当增加与当前生产实践或与环境工程发展有关的新技术，如饮用水的卫生检验、自然水体中叶绿素的测定等内容。 五、强调自主设计实验，为激发学生学习本课程的兴趣，发掘学生的创造能力，将近年来的在科学研究或科技竞赛中取得好成绩的实验作为实验内容，如将“壳聚糖包埋活性污泥法污水处理新工艺”和“嗜盐菌的培养与菌紫质的分离与纯化”等作为新增实验内容和演示实验内容，作为我校环境工程微生物学教学的一个亮点。 以上的实验共编成10个实验，大部分实验包括约2-3个学时的内容，可根据实验实际情况适时地进行调整与选做，力争做到学以致用，取得较好的教学效果。 相艳 于北航 2003.2 第一版 2008.10 第二版 2010.8 第三版 微生物学实验室守则 一、为了保证实验室的整洁和实验顺利进行，非必要的物品和书包，请勿带入室内。 二、每次实验前要充分预习实验指导，明确本次实验的目的要求、原理和方法，做到心中有数。 三、实验进行时，应尽量避免在实验室内走动，以免染菌。同时请勿高声谈话，保持室内安静。 四、实验操作要细心谨慎，认真进行观察，及时做好实验记录． 五、凡实验用过的菌种以及带有活菌的各种器皿，应先经高压灭菌后才能洗涤．制片上的活菌标本应先浸泡于3％来苏尔溶液或5％石炭酸溶液中0.5h后再行洗刷．如系芽孢杆菌或有孢子的霉菌，则应当延长浸泡时间。 六、实验过程中，如不慎将菌液洒到桌面或地面，应以5％石炭酸溶液或3％来苏尔溶液浸泡0.5h后才能擦去。如不慎将菌液吸入口中或皮肤破损处或烫伤，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。 七、进行高压蒸汽灭菌时，严格遵守操作规程。负责灭菌的人在灭菌过程中不准离开灭菌室。 八、实验进行培养的材料，应注明组别、名称及处理方法，放于教