问和计算题解说.docVIP

一． 1．组成蛋白质的20种氨基酸依据什么分类？各类氨基酸的共同特性是什么？这种分类在生物学上有何重要意义？ 2．蛋白质的基本结构与高级结构之间存在的关系如何？ 3．Edman反应所有的试剂和反应的特点如何？ 4．何谓蛋白质等电点？等电点时蛋白质的存在特点是什么？ 5．何谓盐析？分段盐析粗分蛋白质的原理是什么？ 6．哪些因素可引起蛋白质变性？变性后蛋白质的性质有哪些改变？ 7．蛋白质分离分析技术常用的有哪几种，简述凝胶过滤、电泳基本原理。 8．有哪些沉淀蛋白质的方法？其中盐析和有机溶剂沉淀法有何区别或特点？ 9．溴化氰在多肽裂解中的作用部位，和裂解产物的末端氨酸残基为何物？ 10．举例说明蛋白质一级结构与功能关系。 11．举例说明蛋白质变构效应与意义。 12．一样品液中蛋白质组分为A（30KD）、B（20KD）、C（60KD），分析说明用SephadexG100凝胶过滤分离此样品时，各组分被洗脱出来的先后次序。 13．多聚赖氨酸（poly－Lys）在pH7时呈无规线团，在pH10时则呈(－螺旋；而多聚的谷氨酸酸（poly－Glu）在pH7时也呈无规线团，而在pH4时则呈(－螺旋，为什么？ 14．简述胰蛋白酶原激活过程。 15．(－螺旋的特征是什么？如何以通式表示？ 16．高浓度的硫酸铵（pH5时）可使麦清蛋白沉淀析出，并用于初步分离该种蛋白的早期步，简要说明其原理。 17．用阳离子交换柱层析一氨基酸混合液（洗脱剂：pH3.25，0.2N柠檬酸钠），其结果如下：①各洗脱峰的面积大小或高度有何含义？②Asp比Glu先洗脱出来的原因？ 吸 光 度 洗脱剂流出体积 18．为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂？ 六、计算题 1．测得一种蛋白质分子中Trp残基占分子量的0.29%，计算该蛋白质的最低分子量（注：Trp的分子量为204Da）。 2．一种蛋白质按其重量含有1.65%亮氨酸和2.48%异亮氨酸，计算该蛋白质最低分子量。（注：两种氨基酸的分子量都是131Da）。 3．某种氨基酸(－COOHpK＝2.4，(－N＋H3pK＝9.6，(－N＋H3pK＝10.6，计算该种氨基酸的等电点（pI）。 4．某种四肽(－COOHpK＝2.4，(－N＋H3pK＝9.8，侧链－N＋H3pK＝10.6侧链－COOHpK＝4.2，试计算此种多肽的等电点（pI）是多少？ 5．有一种多肽，其侧链上羧基30个（pK＝4.3），嘧唑基有10个（pK＝7），(－N＋H3（pK＝10），设C末端(－羧基pK＝3.5，N－末端氨基pK＝9.5，计算此多肽的pI。 6．已知氨基酸平均分子量为120Da。有一种多肽的分子量是15120Da，如果此多肽完全以(－螺旋形式存在，试计算此(－螺旋的长度和圈数。 答案 六、计算题 1.解：Trp残基MW/蛋白质MW＝0.29%，蛋白质MW＝64138Da。 2.解：异亮氨酸/亮氨酸＝2.48%/1.65%＝1.5/1＝3/2 所以，在此蛋白质中的亮氨酸至少有2个，异亮氨酸至少有3个。由此推理出： 1.65%＝2×（131－18）/蛋白质MW 答案：蛋白质MW＝13697Da。 3.答案：pI＝10.1 4.答案：pI＝7.0 5.解：要计算多肽的等电点，首先应该找到静电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有（30＋1）个单位负电荷，而正电荷最多只有（15＋10＋1）个，相差了5个电荷。要想让正负电荷数相等，只能让30个羧基（侧链－COOHpK＝4.3）少带5个负电荷（(－COOHpK＝3.5，它比侧链－COOH易于解离，难于接受质子），即在30个侧链－COOH中有25个处于解离状态（－COO－），5个不解离（－COOH）。因此： pH＝pKa＋lg（[碱]/[酸]）＝4.3＋lg（25/5）＝5.0。 解：答案：肽链长度＝43.92(nm)；该蛋白质（或多肽）分子量＝14640Da 二． 五、问答题 1．核酸的组成和在细胞内的分布如何? 2．核酸分子中单核苷酸间是通过什么键连接起来的？什么是碱基配对？ 3．简述DNA和RNA分子的立体结构，它们各有哪些特点？稳定DNA结构的力有哪些？ 4．下列三种DNA中，哪个的Tm值最高？哪个的Tm值最低？为什么？ A、AAGTTCTCTGAATTA B、AGTCGTCAATGCATT C、GGATCTCCAAGTCAT TTCAAGAGACTTAAT TCAGCAGTTACGTAA CCTAGAGGTTCAGTA 5．将下列DNA分子加热变性，再在各自的最适温度下复性，哪种DNA复性形成原来结构的可能性更