血红蛋白测定.pptVIP

血红蛋白的测定（HiCN法） 一、实验目的 掌握血红蛋白浓度的测定方法 了解血红蛋白浓度测定的临床意义 二 实验原理 血红蛋白（Hb） 高铁血红蛋白（Hi） 再和氰根结合生成 红棕色 的氰化高铁血红蛋白（HiCN） 在540nm处测吸光度。 三 实验试剂和器材 采血针 毛细管 消毒棉球 棉签 75%酒精 标准曲线试剂盒 10ml比色管 比色皿 紫外分光仪 文齐氏液 文齐氏液 KCN 77mmol/L K3Fe(CN)6 60mmol/L KH2PO4 102mmol/L TritonX-100 1500mmol/L 四 实验步骤 用移液管吸取5ml文齐氏液至10ml比色管中 酒精棉球消毒手指 采血针扎无名指指腹 用毛细玻璃管采血 20ul 立即放入比色管中，剧烈震荡至均匀 静置5min待测 四 实验步骤 到 二楼实验室 用紫外分光光度计 测定吸光度值 ,测定波长为 540 nm 先用 文齐氏液 调零 五 注意事项 文齐氏液不能保存在塑料瓶中，以免CN-吸附，造成A值降低 CN-有毒性，实验时注意保护自己 六、结果与讨论 正常值： 成年男性120-160 g/L 成年女性110-150 g/L 新生儿 170-200 g/L 作业请于本周三之前交至学院楼620办公室 谢谢 * * 制定标准曲线 (氰化高铁血红蛋白标准液) 血红蛋白浓度C (g/L) 50 100 150 200 吸光度值A 用 蒸馏水 调零 检测待测样品的A *