2第二章基因工程的工具酶.ppt

S1核酸酶的基本反应II：内切带缺口或裂口的双链DNA或RNA 5’… G-C-T-C-A-G C-T-G-G-A-G-T… 3’ 3’ … C-G-A-G-T-C-G-A-C-C-T-C-A… 5’ 5’ … G-C-T-C-A-G-C-T-G-G-A-G-T… 3’ 3’ … C-G-A-G-T-C A-C-C-T-C-A… 5’ nick gap S1 nuclease Zn2+ 5’… G-C-T-C-A-G 3’… C-G-A-G-T-C T-G-G-A-G-T… 3’ A-C-C-T-C-A… 5’ S1核酸酶的重要用途 去除DNA片段的单链突端，使之成为平端 去除cDNA合成时形成的发夹结构 通过S1核酸酶保护实验，分析转录产物 成熟mRNA与基因组DNA杂交后，结合此酶水解，可定位内含子 修整渐进性删除突变的末端 S1核酸酶的重要用途：定位内含子（S1 mapping） EcoRI 杂交 S1 mRNA DNA * * 第二章 基因工程的工具酶（6学时） 6.单链内切双链外切的核酸酶：Bal31核酸酶 从双链DNA的两端（3’和5’）同时水解两条链 对两条链的水解速度不一定相等 结果是双链从两头缩短，彻底水解为单核苷酸 Bal31核酸酶的基本特性：来自艾氏交替单胞菌（A. espejiana） Ca2+ 5’ dNMPs 或