生化分离作业整理.docVIP

第一章 绪论 1、生化分离工程 指从发酵液或酶反应液或动植物细胞培养液中分离、纯化生物产品的过程。 3、生化分离工程的研究对象 对于由生物界自然产生的或由微生物菌体发酵的、动植物细胞组织培养的、酶反应、天然资料、生物材料、海洋生物培养等各种生物工业生产过程获得的生物原料，经提取分离、加工并精制目的成分，最终使其成为产品的技术。 4、生物产品的特点 （１）发酵液和培养液是产物浓度很低的水溶液。 （2）培养液本身是多组分的混合物。 （３）生化产物的稳定性差。 （４）对最终产品的质量要求很高。 5、高速离心机、电泳分离血清蛋白由哪位科学家发明的 离心机：瑞典科学家斯维德伯格 电泳分离血清蛋白：瑞典生物化学家梯塞里亚斯 第二章 发酵液预处理 1、凝聚（coagulation）：在中性盐（如铝、铁的盐类）作用下，由于双电层排斥电位的降低，而使胶体体系不稳定的现象。 粒子相互聚集成１ mm 大小块状凝聚体 絮凝（flocculation） ：在高分子絮凝剂存在下，基于架桥作用，使胶粒形成粗大的絮凝团的过程，是以物理集合为主的过程。 胶体粒子交联成网，形成10mm大小絮凝团 3、混凝 ： （1）对于带负电荷的菌体或蛋白质来说，采用阳离子型高分子絮凝剂同时具有降低胶粒双电层电位和产生吸附桥架的双重机理，单独使用可达到较好絮凝效果； （2）对于非离子型和阴离子型高分子絮凝剂，要采用凝聚和絮凝双重机理才能提高过滤效果。 这种包括凝聚和絮凝机理的过程，称为混凝。 4、微生物发酵和细胞培养的目标产物主要有：菌体 、胞内产物 胞外产物 5、无机离子的去除方法： Ca2+ ——草酸、草酸钠，→形成草酸钙沉淀（注意回收草酸） ； Mg2+——三聚磷酸钠，→形成三聚磷酸钠镁可溶性络合物； Fe2+ ——黄血盐，→普鲁士兰沉淀 6、除钙离子时，什么情况下可用草酸钠 由于草酸的溶解度较小，用量大时可用草酸钠。 7、发酵液的基本特性： 发酵液多为粘度大的悬浮液，一般为非牛顿性流体，不易过滤。 目标产物在发酵液中的浓度通常较低。 发酵液的成分复杂，大量的菌丝体、菌种代谢物和剩余培养基会对提取造成很大影响。 8、发酵液预处理的目的： 预处理的目的：促进从悬浮液中分离固形物的速度，提高固液分离的效率： ⑴改变发酵液的物理性质，包括增大悬浮液中固体粒子的尺寸，降低液体黏度 ⑵ 相对纯化，去除发酵液中的部分杂质（高价无机离子和杂蛋白质），以利于后续各步操作 ⑶尽可能使产物转入便于后处理的一相中（多数是液相） 8、发酵液预处理过程一般包括： 发酵液杂质的去除。包括除去蛋白质、无机离子以及色素、热源、毒性物质等有机物质； 改善培养液的处理性能。主要通过降低发酵液的黏度、调节适宜的pH值和温度、絮凝与凝聚等操作来实现。 9、除钙离子加入草酸的好处： 可以去除钙离子 、 可与镁离子形成草酸镁，去除部分镁离子 、 草酸可酸化发酵液，使发酵液的胶体状态改变，有助于目标产物转入液相 、 反应生成的草酸钙还能促使蛋白质凝固，提高滤液质量 10、除杂蛋白的方法有哪些： 沉淀法precipitation ：等电点沉淀法、酸碱调节，使蛋白质与离子形成沉淀 变性法 denaturation ：加热、大幅度调节pH值、加酒精、丙酮等有机溶剂或表面活性剂等。 吸附法 adsorption ：加入某些吸附剂或沉淀剂吸附杂蛋白质而除去。 11、叔米—哈第法则（Schulze—Hardy） ： （1）、反离子的价数越高，凝聚价越小，即凝聚能力越强。 （2）、阴离子对带负电荷的胶粒凝聚能力受化合价、水化半径、离子运动能力的影响，次序依次为 铝离子＞铁离子＞氢离子＞钙离子＞镁离子＞钾离子＞钠离子＞锂离子 第三章 发酵液的固液分离 1、过滤（filtration）：过滤是利用多孔性介质（如滤布）截留固液悬浮物中的固体颗粒，从而实现固液分离的方法。 2、过滤速率：指单位时间内通过过滤面积的滤液体积，又称为滤液的透过速率。 3、离心分离： 离心分离是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异，依靠惯性离心力的作用，在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程。 4、传统的过滤单元操作，根据过滤机理不同，分为深层过滤和滤饼过滤两种。 5、发酵液固液分离的主要方法是离心（Centrifugation）和 过滤（filtration） 影响发酵液固液分离的因素： 1）发酵液中悬浮粒子的大小 2）发酵液的黏度viscosity 7、固液分离的目的： 收集含胞内产物的细胞或菌体，分离除去液相。 收集含生化物质的液相，分离除去固体悬浮物（细胞、菌体、细胞碎片、蛋白质的沉淀物和它们的絮凝体等）。 8、助滤剂及在过滤中的作用： 加入助滤剂后，悬浮液