2015版无菌和微生物变更试卷.ppt

2015版药典无菌变更内容 项目内容 2010版药典 2015版药典 供试品的无菌检查 培养及观察： 将上述含培养基的容器按规定的温度培养14天；培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。如在加入供试品后或在培养过程中，培养基出现浑浊，培养14天后，不能从外观上判断有无微生物生长，可取该培养液适量转种至同种新鲜培养基中，细菌培养2天，真菌培养3 天，观察接种 的同种新鲜培养基是否再出现浑浊；或取培养液涂片，染色，镜检，判断是否有菌。 观察： 培养及观察： 将上述接种供试品后的培养基容器分别按各培养基规定的温度培养14天；接种生物制品供试品的硫乙醇酸盐流体培养基的容器应分成两等份，一份置30?35℃培养，一份置20?25℃培养。培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。如在加入供试品后或在培养过程中，培养基出现浑浊，培养14天后，不能从外观上判断有无微生物生长，可取该培养液适量转种至同种新鲜培养基中，培养3 天，观察接种 的同种新鲜培养基是否再出现浑浊；或取培养液涂片，染色，镜检，判断是否有菌。 * 2015版药典无菌变更内容 项目内容 2010版药典 2015版药典 供试品的无菌检查 表1：批出厂产品最少检验数量 表1 批出厂产品及生物制品的原液和半成品最少检验数量 表2 液体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验数量 表2 上市抽验样品的最少检验数量 表3 固体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验数量 表3 供试品的最少检验量 以上表中内容均进行修订，具体见各表 * 2015版药典微生物变更内容 * 2015版药典微生物计数法变更内容 项目内容 2010版药典 2015版药典 定义 微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。 微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。 当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合相应的微生物限度标准时，应按下述规定进行检验，包括样品的取样量和结果的判断等。除另有规定外，本法不适用于活菌制剂的检査。 检验环境 微生物检查应在环境洁净度10000级下局部洁净度100级的单向流空气区域或隔离系统中进行，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度验证。 微生物计数试验环境应符合微生物限度检查的要求。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监测。 * 2015版药典微生物计数法变更内容 项目内容 2010版药典 2015版药典 检验规定 供试品检査时，若使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应确认其有效性及对微生物无毒性。 如供试品有抗菌活性，应尽可能去除或中和。供试品检査时，若使用了中和剂或灭活剂，应确认其有效性及对微生物无毒性。 供试液制备时如果使用了表面活性剂，应确认其对微生物无毒性以及与所使用中和剂或灭活剂的相容性。 培养温度 除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为3 0?3 5 ℃，霉菌、酵母菌培养温度为23? 28℃。 按表1规定条件下培养 * 2015版药典微生物计数法变更内容 * 表1 试验菌液的制备和使用 试验菌株 试验菌液的制备 计数培养基适用性检查 计数方法适用性试验 需氧菌总数计数 霉菌和酵母菌总数计数 需氧菌总数计数 霉菌和酵母菌总数计数 金黄色葡萄球菌 ( Staphylococcus a u reu s) C C M C C (B ) 26 003〕 胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆 胨液体培养基，培养温度3 0 ?3 5 ℃ ，培养时间1 8?24小时 胰酪大豆胨琼脂培养 基和胰酪大豆胨液体培 养基，培养温度3 0 ? 35℃, 培养时间不超过 3 天， 接种量不大于100cfu。 胰酪大豆胨琼脂培养 基或胰酪大豆胨液体培 养基（M P N 法），培养温度30?3 5℃, 培养时间不超过3 天，接种量不 大于100cfu。 2015版药典微生物计数法变更内容 * 表1 试验菌液的制备和使用 试验菌株 试验菌液的制备 计数培养基适用性检查 计数方法适用性试验 需氧菌总数计数 霉菌和酵母菌总数计数 需氧菌总数计数 霉菌和酵母菌总数计数 铜绿假单胞菌 (Pseudomonas aeruginosa) CCMCC ( B ) 10 104〕 胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆 胨液体培养基，培养温度3 0 ?3 5 ℃ ，培养时间1 8?24小时 胰酪大豆胨琼脂培养 基和胰酪大豆胨液体培 养基，培养温度3 0