动物性食品中有机磷农药测定的标准操作程序.docVIP

动物性食品中有机磷农药测定的标准操作程序 1.1适用范围 本程序适用于用气相色谱仪法、气相色谱质谱联用仪对动物性样品（腌腊肉制品、腌腊水产品）中有机磷农药含量的测定。 本程序适用于动物性样品（腌腊肉制品、腌腊水产品）中有机磷类农药残留的测定,本方法各种有机磷的检出限为0.01mg/kg。 1.2 原理 试样经乙腈提取，冷冻、过滤，有机相浓缩液经SILICA/SPA固相萃取柱净化，用GC-FPD进行定性定量分析 1.3仪器、设备与试剂 1.3.1.1 气相色谱仪，带Ms或者FPD检测器 1.3.1.2色谱柱：DB-1701石英毛细管色谱柱（30m×320μm i.d. ×0.25μm（膜厚）） 1.3.1.3 组织捣碎机 1.3.1.4 旋转蒸发仪 1.3.1.5 具塞试管、平底烧瓶等玻璃仪器 1.3.2 试剂 1.3.2.1 乙腈：色谱纯 1.3.2.2 丙酮：色谱纯 1.3.2.3 二氯甲烷：色谱纯 1.3.2.4 氯化钠：分析纯 1.3.2.5 无水硫酸钠：分析纯，600℃灼烧3小时 1.3.2.6固相萃取柱：SILICA/SPA固相萃取柱, 规格为1000mg/6mL 1.3.2.7 各农药标准品：见表1 1.3.2.8 标准储备液配制：称取各农药标准品各0.0500g,用丙酮溶解并定容至50mL，摇匀，浓度为1.00mg/mL。吸取上述溶液10.0mL于100mL的容量瓶中，用丙酮定容至刻度，摇匀，浓度为100ug/mL。 1.3.2.9 标准工作液的配制：按照需要吸取各农药标准储备液，10倍法稀释至所需浓度，有机磷农药稀释至1.0μg/mL，配制成混合标准工作溶液。 1.4 样品处理及分析 1.4.1 样品采集：样品采集的标准化是获得准确数据的基础，抽样必须是随机的和有代表性的，能反映出样品的真实情况。 1.4.2 样品的制备和保存：取一定量切碎混匀，四分法取样。所取的样品平均分为2份，1份供测定，另1份放置于-20℃冰箱中保存，备用。 1.4.3提取：称取切碎或磨碎混匀的样品5.0g左右于50ml离心管中，加入25ml乙腈，用组织匀浆机匀浆1min左右，超声10min；冷冻2hr,然后采用-4℃冷冻8000rpm离心机离心5min，分出上清液加入5ml饱和氯化钠溶液混匀，冷冻2hr,然后采用-4℃冷冻8000rpm离心机离心5min，上清液过无水硫酸钠于50mL平底烧瓶中（注意充分脱水）， 45℃水浴中减压浓缩至3ml左右浓缩液，待净化。 1.4.4 净化：先用5mL乙腈淋洗液活化SILICA/PSA柱，然后将上述浓缩液转移到SILICA/PSA柱并收集，液面到达SPE柱筛板表面后，再10mL乙腈淋洗收集于50mL平底烧瓶中，45℃水浴中减压浓缩至近干，氮气吹干 用1-2mL丙酮准确定容，待GC/FPD分析测定。 1.4.5仪器条件 1.4.5.1气相色谱参考条件 色谱柱：DB-1701石英毛细管色谱柱（30m×320μm×0.25μm）；氮气：氦气（纯度＞99.99％）；程序升压：初始压力10Psi（10Psi＝68.966kPa），保持30min，40mL／min升至20Psi，保持10min；柱温（程序升温）：初始温度：50℃（保持0min），20℃／min升至200℃（保持20min），40℃／min升至240℃（保持10min）；进样口温度：250℃；FPD检测器温度250℃；尾吹气：30mL／min；进样方式：分流进样；分流比：5∶1；进样量：1μL。 1.4.6 标准色谱图及样品加标色谱图 1.5计算 按公式（1）计算。 Rx＝………………………………（1） 其中式中： Rx——待测样品中农药浓度 mg/kg R1——标准品中农药浓度 μg/mL A2——待测样品中农药的峰高或峰面积 A1——标准品中农药的峰高或峰面积 V2——待测样品进样体积 μL V1——标准品进样体积 μL G ——待测样品量 g V ——待测样品定容体积 mL 1.6实验室质量控制 为了保证分析结果的准确，要求每批样品至少做一个加标回收实验和一份平行样品，添加有机磷浓度在0.05mg/kg左右，计算添加回收率，添加回收率应在60-120%范围之内。