实验五邻二氮菲分光光度法测定铁的含量.doc

实验五 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量 一、实验目的 1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法; 2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。 二、实验原理 邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH 2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。配合物的＝21.3，摩尔吸光系数＝11000 L·mol-1·cm-1。 在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。 4Fe3+＋2NH2OH→4Fe2+ ＋ N2O ＋ 4H＋＋ H2O 测定时，控制溶液pH＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。 用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。 三、仪器与试剂 1．醋酸钠：l mol·L-1； 2．氢氧化钠：0.4 mol·L-1； 3．盐 酸：6 mol·L-1；、 4．盐酸羟胺：100g·L-1（临时配制）； 5．邻二氮菲（1.5g·L-1）：0.l5g邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。 6．铁标准溶液 1 100μg·mL-1铁标准溶液：准确称取0.8634gNH4Fe（SO4）2·12H20于200ml烧杯中，用6 mol·L-1盐酸20 mL溶解，移至1 L容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。 2 10 μg·mL-1（即0.01 mg·mL-1）铁标准溶液：用移液管吸取10ml100μg·mL-1铁标准溶液于100ml容量瓶中，加入2ml 6 mol·L-1盐酸，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。 7．仪器 7230G分光光度计及l cm比色皿。 四、实验步骤 准备工作： 打开仪器电源开关，预热。调解仪器。 ? 测量工作：（以通过空白溶液的透射光强度为I0, 通过待测液的透射光强度为I,由仪器给出透射比T,再由T值算出吸光度A值.） 1. 测定条件的选择 （1）. 吸收曲线的绘制：取两个50ml容量瓶，用吸量管准确吸取100μg·mL-1铁标准溶液0.0ml和1.0 mL，分别置于50 mL容量瓶中，加入盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀后加入醋酸钠溶液5 mL和邻二氮菲溶液2 mL，以水稀释至刻度，摇匀。放置10min后，在分光光度计上，用l cm比色皿，以试剂空白（即0.0ml铁标准溶液）为参比溶液，用不同的波长，从440～560 nm之间，每隔10 nm测定一次吸光度，在最大吸收波长处附近多测定几点。然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定进行测定铁的适宜波长（即最大吸收波长）。 波长（nm） 440 450 460 470 480 490 494 496 498 500 吸光度 波长（nm） 502 504 506 508 510 520 530 540 550 560 吸光度 （2）邻二氮菲与铁的配合物的稳定性 用上面溶液继续进行测定，在最大吸收波长510 nm处，从加人显色剂后立即测定一次吸光度，经15min，30 min，45 min，60 min后，各测一次吸光度。以时间（t）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制A－t曲线，从曲线上判断配合物稳定的情况。 （3）显色剂浓度的影响 取25 mL容量瓶7个，用吸量管准确吸取100μg·mL-1铁标准溶液1.0 mL于各容量瓶中，加入盐酸羟胺溶液1mL摇匀，再加入l mol·L-1醋酸钠5 mL，然后分别加入0.1％邻二氮菲溶液0.3，0.6，1.0，l.5，2.0，3.0和4.0 mL，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，用适宜波长（510 nm），1 cm比色皿，以水为参比测定不同用量显色剂溶液的吸光度。然后以邻二氮菲试剂加入毫升数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制A一V曲线，由曲线上确定显色剂最佳加入量。 （4）根据上面条件实验的结果，找出邻二氮菲分光光度法测定铁的测定条件并讨论之。 2．铁含量的测定 （1） 标准曲线的绘制 取50mL容量瓶6个，分别准确吸取10μg·mL-l铁标准溶液0.0，2.0，4.0，6.0，8.0和10.0 mL于各容量瓶中，各加盐酸羟胺溶l mL，摇匀，再各加醋酸钠溶液5 mL和邻二氮菲溶液2mL，以水稀释至刻度，摇匀。经10 min放置后，在分光光度计上用l cm比色皿，以试剂空白为参比溶液，在最大吸收波长（510 nm）处以水为参比测定各溶液的吸光度，以含铁总量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 铁标液体积（mL） 0.00 20 4.0 6.0 8.0 10.0 铁浓度（μg/mL） 吸光度A ·L-1