专题7小专题19生物技术实践优秀课程.pptVIP

【热点考向3】 DNA 等重要物质的提取 【例3】(2011·浙江卷)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是(　　) A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物 B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质 C．将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色 D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同 【解析】DNA在浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小，DNA析出；木瓜蛋白酶能够水解样品中的一部分蛋白质；DNA溶解于2 mol/L NaCl溶液中，在沸水浴条件下遇二苯胺试剂呈现蓝色；用植物材料提取DNA时，需用洗涤剂处理材料以溶解细胞膜。 【答案】 B 【变式3】 (2011·江苏卷)下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是( ) A．腐乳制作所需要的适宜温度最高 B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵 C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA 【解析】果醋制作所需的适宜温度为30 ℃～35 ℃，果酒制作的最适温度为18 ℃～25 ℃，腐乳制作的最适温度为16 ℃左右；由于醋酸菌为好氧型细菌，所以果醋发酵为有氧发酵；三种发酵产品的制作所涉及的微生物依次是酵母菌、醋酸菌、毛霉；酵母菌、毛霉为真菌，醋酸菌为细菌，前两者为真核生物，后者为原核生物，它们均具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA。 【答案】 D 专题七　 选修内容 小专题19　生物技术实践 1．微生物的实验室培养要点解读 划分 标准 培养基种类 特点 用途 物理 性质 液体培养基 不加凝固剂 活菌计数、工业生产 半固体培养基 加凝固剂 如：琼脂　 观察微生物的运动、分类鉴定 固体培养基 微生物分离、鉴定、保藏菌种 (1)培养基的主要种类 划分标准 培养基种类 特点 用途 用途 　　 选择培 养基 培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物生长 培养、分离出特定微生物 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物 （续表） (2)消毒和灭菌的区别 条件 结果 常用的方法 应用的范围 消 毒 较为温 和的物 理或化 学方法 仅杀死物质表面 或内部一部分对 人体有害的微生 物 煮沸消毒法 一般物品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 化学药剂 用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源等 灭 菌 强烈理 化因素 杀死物体内外所 有微生物，包括 芽孢和孢子 灼烧灭菌 接种工具 干热灭菌 玻璃器皿、金属工具 高压蒸汽灭 菌 培养基及容器的灭菌 (3)纯化大肠杆菌的原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这些单个的菌落就是一个个纯化的细菌菌落。 2．酵母细胞的固定化 (1)实验原理：①固定化酶不溶于反应液中，易于回收，可以重复使用。②固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定于一定空间内的技术。 (2)直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较 方法 优点 缺点 直接使 用酶 催化效率高、耗能 低、污染低 对环境条件非常敏感、易失 活；难回收，成本高，影响 产品质量 固定 化酶 既能与反应物接 触，又能与产物分 离；可以反复利用 不利于催化一系列的酶促反 应 固定化 细胞 成本低、操作容易 反应物不易与酶接近，尤其 是大分子物质，反应效率较 低 (3)制备固定化酵母细胞取得成功的关键 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，如果浓度过高，将很难形成凝胶珠，如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少，都会影响实验效果。溶化海藻酸钠时要用小火或间断加热，避免海藻酸钠发生焦糊。 3．五种重要物质的提取 提取 物质 提取 方法 提取原理 步骤 DNA 盐析法 ①DNA在不同浓度 的NaCl溶液中溶解不 同；②DNA不溶于 酒精，但某些蛋白质 则溶于酒精 ①溶解在2 mol/L的NaCl溶 液中；②加水稀释NaCl溶 液至0.14 mol/L使DNA析 出、过滤；③加入冷却酒 精析出DNA 血红 蛋白 凝胶色谱法 根据相对分子质量 的大小 ①样品处理；②粗提取； ③纯化；④纯度鉴定 电脉法 根据各种分子带电性 质的差异及分子本身 大小、形状的不同 (1)提取方法总结 (续表) 提取 物质 提取 方法 提取原理 步骤 玫瑰 精油 水蒸气 蒸馏法 利用水蒸气将挥 发性较强的植物 芳香油携带出来 ①水蒸气蒸馏；② 分离油层；③水、 过滤 橘皮 精油 压榨法 通过机械加压， 压榨出果皮中的 芳香油 ①石灰水浸泡、漂 洗；②压榨、过滤 静置；③再次过滤 胡萝 卜素 萃取法 使提取物溶解在 有机