fzswx5-1-0_07_蛋白质合成技术总结.ppt

* 2. DNA的复制和修复 1. 绪论 目录 3 DNA重组 4. RNA的生物合成 5. 蛋白质合成 5. 蛋白质合成 5.1 概述 5.2 遗传密码 5.3 蛋白质合成场所---核糖体及多核糖体 5.5 蛋白质合成过程 5.4 氨基酸的激活与氨酰 – tRNA 的合成 5.6 蛋白质合成后的成熟和易位 5.1 概述 蛋白质是生命活动的重要物质基础，是分子生物学研究的主要大分子。 生长、发育、生殖、对外界环境的适应、抗胁迫（抗热、冷、寒、病、污染等）、对外界刺激的持续反应过程等无不与基因的表达,即蛋白质合成后产生的生理生化反应相关. 通过蛋白质合成和不断周转，生物体代谢及其生理过程也 在不断转换，从而导致一系列的生命过程： 蛋白质合成过程是基因表达的过程 蛋白质合成的主要组分： 模板：mRNA（遗传密码）。 转接器：tRNA 模板信息与肽链之间。 场所：核糖体（包括酶 ----转肽酶）。 原料：20种氨基酸。 酶和蛋白因子：氨酰 tRNA合成酶； 起始因子、延伸因子、 以上共计200余种大分子。 释放因子 （终止因子）。 蛋白质合成以后，经过折叠、剪切、修饰成为有功能的蛋白。 许多蛋白质，还要经移位、分泌、才能到达功能位置。 合成的膜蛋白、复合蛋白还要进行装配，才能稳定和发挥功能。 蛋白质合成中多肽链的氨基酸排列顺序受DNA(RNA) 的指令。 5.2 遗传密码 5.2.1 遗传密码的破译 5.2.2 遗传密码 1954年Gammon提出“遗传密码”（genetic code)。 1961年 Brenner 和 crick用遗传实验证明3个核苷酸组成一个密码子，因此20种氨基酸共有43 = 64个密码子。 5.2.3 遗转密码的变异 5.2.1 遗传密码的破译 1. 体外翻译系统：研究蛋白质合成机制的体系 网质红细胞裂解系统 细菌（大肠杆菌）无细胞系统 动物肝无细胞系统 麦胚系统 （丰产三号） 无细胞翻译体系自身的mRNA可被自解，此后加入外源mRNA(人工合成模板）则可利用无细胞翻译体系的蛋白质合成组分，研究mRNA的编码情况。 无细胞体系 为什么要用无细胞体系? 网织红细胞是红细胞的前身。骨髓中红细胞系统的增生发育过程是：多能干细胞→单能干细胞→原始红细胞→早幼红细胞→中幼红细胞→晚幼红细胞→网织红细胞→成熟红细胞。 2. 均聚核苷酸指导均聚肽： polyU poly Phe polyC poly Pro polyA poly Lys 3. 特定共聚核苷酸： Poly(UG) UGUGUGUGUGUG Cys Val Poly(Cys Val) 用不同翻译模版破译密码子 4. 核糖体结合技术 1964 Nirenberg a. 三核苷酸可起模板作用 b. 无GTP时， 可促进其对应的tRNA-AA 结合在核糖体上。 c. 结合tRNA的核糖体复合物可被硝化纤维膜 吸附。三联体已知，AA被标记，只有带标 记的AA-tRNA与核糖体结合后才被膜吸 附，标记在膜上；未标记的AA – tRNA或 标记但未与核糖体结合的AA-tRNA则被 洗脱。 （图5 – 1 ） 5.2.2 遗传密码 5.2.2.1 遗传密码表 5.2.2.2 遗传密码的性质 5.2.2.3 密码的简并性与变偶假说 5.2.2.4 偏爱密码子 5.2.2.5 起始密码子和终止密码子 5.2.2.2 遗传密码的性质 一个密码子: Met, Trp 2个密码子: Phe, Tyr, His, Gln, Glu, Asn, Asp, Lys, Cys, 3个密码子: Ile, 4个密码子: Val，Pro, Thr, Ala, Gly 6个密码子: Leu, Arg, Ser （图5-3） 1. 每个