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IPTG残留量的检测
IPTG残留量的检测
原理与标准：
本品经过实验研究，对制品中的IPTG残留量采用HPLC方法检测。根据IPTG的浓度与210nm吸收峰峰面积的相关关系，可以计算出样品中的IPTG残留量。
企业标准：成品中每毫克SA的IPTG残留量不超过20ng。
仪器与方法：
仪器：岛津LC－100
色谱条件：层析柱：Shim－Pack ODS 15 cm×0.6cm
流动相：A液： 1‰TFA水溶液 B液： 1‰TFA乙腈液 B％：0-10min：0％－50％ 10-11min：50％－0％
检测波长：210nm
进样量：20ul
标准溶液：
配制1mg/ml的IPTG乙腈溶液，稀释成下列浓度：
0.375ug/ml，0.75ug/ml，1.5ug/ml，3ug/ml，6ug/ml，12ug/ml.
测定：
最低检测极限 上述标准溶液的测定表明， IPTG浓度为0.375ug/ml时进样20ul检测不出吸收峰，IPTG浓度为0.75ug/ml时进样20ul检测出峰面积为817，表明本方法最低检测极限低于0.75ug/ml.
标准曲线：
IPTG标准曲线 浓度（ug/ml） 面积 0.75 817
1.5 1651 3 3227 6 6417 12 13259
ｒ 0.9998， Y 0.00091X+0.05529 样品测定：
样品：座机电话号码P，座机电话号码P，座机电话号码P
每瓶样品加2ml乙腈，充分振荡后10000rpm，离心15min，取上清，进样20ul。
结果
测定结果显示三批样品均未检出IPTG吸收峰。 即IPTG残留浓度低于检测极限值0.75ug/ml。
SA为100mg，用2ml乙腈萃取，经计算，每mg SA的IPTG残留量低于15ng。
结论：样品IPTG残留符合规程。
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