第3章 抗体制备.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 2. 离子交换层析法 常用的离子交换剂有DEAE纤维素或QAE纤维素。此法获得的IgG较纯，不含其它杂蛋白。 3. 亲和层析法装柱上样结合洗脱 Sephadex G25-SPA （二）特异性抗体的纯化 单价特异性：指抗血清只与其特异性抗原发生反应。 有时免疫原不纯，含有微量的杂抗原，制备出的抗血清中出现2-3种杂抗体。 １.亲和层析法 交叉杂抗原 Sepharose4B 单价特异性抗体 抗体 ２、吸附法 双功能交联剂 固相吸附剂 收集上清液 抗血清 ＋ 交叉抗原液 第四节 单克隆抗体的制备及应用 一、杂交瘤技术的基本原理 细胞工程抗体——杂交瘤-单克隆抗体 骨髓瘤细胞 致敏的B淋巴细胞 杂交瘤 二、杂交瘤细胞 的 制备过程 三、单克隆抗体的生产 1.动物体内诱生法 2.体外细胞培养法 3.兔单克隆抗体 四、单克隆抗体纯化 五、单克隆抗体鉴定 六、单克隆抗体的特性 1.高度特异性 2.高度均一性 3.弱凝集反应和不呈现沉淀反应 4.细胞毒作用较弱 5.对环境敏感性 七、单克隆抗体的应用 1.临床检验诊断试剂 2.蛋白质的纯化 3.肿瘤的导向治疗 4.放射免疫显像技术 第五节 基因工程抗体及应用 人源化抗体 小分子抗体