生物技术导论重点计划.docxVIP

第1-2章概念的理解：生物技术——应用生命科学研究成果，以人们意志设计，对生物或生物的成分进行改造和利用的技术。现代生物技术综合分子生物学、生物化学、遗传学、细胞生物学、胚胎学、免疫学、化学、物理学、信息学、计算机等多学科技术，可用于研究生命活动的规律和提供产品为社会服务等。食品生物技术——是现代生物技术在食品领域中的应用，是指以现代生命科学的研究成果为基础，结合现代工程技术手段和其他学科的研究成果，用全新的方法和手段设计新型的食品和食品原料。基因工程——所谓基因工程，就是利用DNA体外重组或扩增技术从供体生物基因组中分离感兴趣的基因或DNA片段，或是经过人工合成的方法获得基因，然后经过一系列切割，加工修饰，连接反应产生重组DNA分子，再将其转入适当的受体细胞，以期获得基因表达的过程。食品基因工程——是指利用基因工程的技术和手段，在分子水平上定向重组遗传物质，以改良食品的品质和性状，提高食品的营养价值、贮藏加工性状及感官性状的技术。基因重组——所谓基因重组，即造成基因型变化的核酸的交换过程。包括发生在生物体内(如减数分裂中异源双链的核酸交换)和在体外环境中用人工手段使不同来源DNA重新组合的过程。克隆(Cloning)：提取供体生物的目的基因（或称外源基因），通过限制性内切酶、DNA聚合酶连接到另一个载体的DNA的分子上。基因食品——转基因食品是利用分子生物学技术，将某些生物的基因转移到其他物种中去，使其性状、营养品质、消费品质向人类所需要的目标转变。转基因食品大致可以分为两大类，一是改造现有的基因，使一些性状不表现出来；另外一类是导入其他的基因，从而产生新的性状。思考题：1. 什么是基因重组？DNA重组技术包括哪几个步骤？答：所谓基因重组，就是利用限制性内切酶和其他一些酶类，切割和修饰载体DNA和目的基因，并将两者连接起来的过程。DNA重组技术步骤：（1）DNA片段的产生，也就是目的基因的制取;(2)外源基因DNA与载体的连接反应（主要有黏末端连接、平末端连接、同聚物加尾连接和人工接头连接4种）；（3）将重组DNA导入合适的宿主细胞，根据所用载体与宿主细胞的不同，选用转化、转染、转导等不同途径；（4）通过选择或筛选，找到含有理想重组体的受体细胞。2. 什么是限制性内切酶？简述其分类、特点及其作用。答：限制性内切酶：能在特定位置上切割DNA的酶可分为3类：（1） I型限制性内切酶：是多聚体蛋白质，具有切割DNA的功能，作用时需要ATP、Mg2+和S-腺苷蛋氨酸（SAM）的存在。切割DNA的方式是，先与双链DNA上未加修饰的识别序列相互作用，然后沿着DNA分子移动，在行进相当于1000~5000个核苷酸的距离之后再随机位置上切割单链DNA。由于这类酶不能专门切割DNA的某些特殊位点，所以未在基因工程操作中大量使用。（2） II型限制性内切酶：是一类分子质量较小的单体蛋白，作用时仅需要Mg2+存在即可维持活性，它可在特殊位点切割DNA，产生具有粘性末端或其他形式的DNA分子片段，因此这类酶被广泛地应用于基因工程，成为分解和重建DNA的基本工具。（3） III型限制性内切酶：是指一些具有独特的识别方式和切割方法的内切酶，如MboII，它识别GAAGA序列（注意：不存在二分体式的对称），然后再DNA的每一条链上识别序列的一侧开始测量一定距离（如8或7个核苷酸）以后进行切割，产生仅有一个碱基突出的3’末端（N表示任意一个碱基）3. PCR技术的基本原理。答：首先，以所要分离目睹基因所在双链DNA分子作为模板，在接近沸点的温度条件下，双链DNA解离开来，然后在相对较低的温度下（50℃左右），根据要求设计的小片段DNA作为引物，它能够与模板DNA结合，在72℃左右，利用DNA聚合酶的作用，开始复制新的DNA链。这是PCR扩增反应的起点。紧接着进行第二轮相同的反应，所不同的是新合成的DNA链与原有模板DNA链同时作为合成模板进行反应。这样经过几十轮的PCR反应，合成DNA链的数量以指数形式增长，即合成Mх2n-1个DNA链（M为模板DNA的量，n为反应循环数），因此该反应液称为链式反应。由于引物位置的限制，最后扩增得到的DNA片段为两个引物之间的序列。于是通过PCR反应能快速得到特异性而且大量的目的基因片段。这就是PCR反应的原理。4. 基因工程在食品产业中的应用。答：（1）利用基因工程改造食品微生物①改良微生物菌种②改良乳酸菌遗传特性c.酶制剂的生产；（2）利用基因工程改善食品原料的品质①改良动物食品性状a.肉品品质改良b.乳品品质改良②改造植物性食品原料a.植物蛋白质品质改良b.植物淀粉改良c.植物油脂改良d.提高食品中的维生素含量e.改善园艺产品的采后品质（3）利用基因工程改进食品生产工艺①利用DNA重组技术改进果糖和乙醇生产方法②改良