实验室猪精液检查及人工授精技术案例.pptVIP

精子不同区域质膜的检测 覆盖于顶体外 膜区上的质膜 覆盖于精子头部 非顶体区的质膜 覆盖于尾部的质膜 荧光染料，如碘化丙锭（PI）、溴化乙锭（EB）、DAPI、 Hoechst 33258等 非荧光染料，如伊红—苯胺黑、伊红—苯胺蓝等 精子的低渗肿胀实验（HOST）检测 通常与顶体外膜完整性的检测联合起来进行 原理： 低渗溶液中，有生物活性的精子质膜会使水分子进入质膜中，水的内流使精子尾部的质膜膨胀并且尾部会发生弯曲。 若精子质膜损伤或失去生物活性，水能够自由通过质膜，在胞质内不会积聚液体，从而不会出现肿胀和尾部弯曲。 等渗液 等渗液 低渗液 精子低渗肿胀检测（HOST） 进入低渗液 进入等渗液 膜完整精子的变化 Q1: PI染色的死精子； Q4: SYBR-14染色活精子； Q2: SYBR-14/PI染色，正在死亡的精子； Q3: 杂质颗粒，无颜色。 精子质膜检测新方法 SYBR-14和PI的联合染色 显微镜进行检测 A：PI染色的死精子，为红色； B：SYBR-14染色活精子，为绿色，膜功能完整； C：SYBR-14／PI染色，正在死亡的精子。 流式细胞仪检测 A A B B C C 线粒体功能检测 精子线粒体检测方法 检测线粒体的染料分类 1 2 检测线粒体