第19章免疫缺陷及免疫应用范例.ppt

* * 检测各群体淋巴细胞的数量与功能是观察机体免疫状态的重要手段。外周血是病人主要的检测标本，但仅代表再循环的淋巴细胞。实验动物还可取胸腺、脾、淋巴结等作为标本进行检查。 二、免疫细胞的检测 PBMC 多形核白细胞 红细胞 血浆 分离液 玻璃平皿 单核细胞吸附,未吸附的为淋巴细胞. 根据比重的不同将血液离心分层 取PBMC 一 免疫细胞的分离 1.外周血单个核细胞的分离 常用密度梯度离心法 2.亚群的分离 尼龙棉柱分离----B细胞 E花环分离---------T细胞 流式细胞术 免疫磁珠 T E花环 流式细胞仪工作原理 3、淋巴细胞亚群的计数 根据表面标志不同，分类计数 免疫荧光 酶免疫组化 流式细胞术 二、免疫细胞功能测定 1、T细胞功能试验： T细胞增殖试验 3H-TdR掺入法 MTT法 细胞毒试验 2、B细胞功能测定：溶血空斑试验 3、皮肤实验： 检测细胞免疫功能 淋巴细胞转化试验（形态学示意图）