化学发光分析具有以下特点 1. 灵敏度极高 荧光素酶和ATP的化学发光分析,可测定2?10-17mol/L的ATP,即可检测出一个细菌中的ATP含量 2. 仪器设备简单——不需要光源、单色器和背景校正 3. 发射光强度测量无干扰——无背景光、散射光等干扰 4. 线性范围宽 5. 分析速度快 缺点:可供发光用的试剂少;发光反应效率低(大大低于生物体中的发光);机理研究少。 二 基本原理 化学发光反应 在化学反应过程中,某些化合物接受能量而被激发,从激发态返回基态时,发射出一定波长的光。 A +B = C + D* D* → D + h? (1)能够发光的化合物大多为有机化合物,芳香族化合物 (2)化学发光反应多为氧化还原反应,激发能与反应能相当 ?E=170~300 kJ/mol;位于可见光区; (3)发光持续时间较长,反应持续进行; 化学发光反应存在于生物体(萤火虫、海洋发光生物)中, 称为生物发光(bioluminescence)。 化学发光反应的类型 (1)液相化学发光 ——研究和应用的比较广泛的有鲁米诺(Luminol)光泽精、没食子酸、洛粉碱、过氧草酸盐等。 鲁米诺是最常用的发光试剂,它可以测定Cl2、HOCl、OCl-、H2O2、O2和NO2,产生化学发光
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