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五味中药对灵芝液体发酵过程的影响
五味中药对灵芝菌液体发酵过程的影响
摘要观察中药对灵芝菌液体发酵过程中生物量和胞外多糖的影响。麻黄、莱蔗子、金银花和
连翘4味中药对生物量有明显促进作用。黄岑对灵芝生长有抑制作用。
关锐词中药,灵芝,发酵,多糖
灵芝(Ganodermalucidum)为担子菌纲,
多孔菌科,灵芝菌属真菌,自古以来就是我国名
贵药用真菌。现代医学研究证明,灵芝中所含
的灵芝多糖和灵芝酸类物质能提高肌体免疫
力,延缓衰老,对老年慢性支气管炎有明显的疗
效。为了定向强化灵芝的药效,作者将中药添
加到灵芝液体培养基中,观察中药成分对灵芝
菌丝体生长及代谢产物胞外多糖的影响。
1材料和方法
1.1材料
灵芝菌:研究室保存的菌种。种子培基养:
葡萄糖209/L,玉米粉109/L,鼓皮粉59/Lo
基础培养基:葡萄糖409/L,蛋白陈49/L,Mg-
5040·759/L,K姚pO41·59/L,几、10mg/LO
中药材:购自无锡山禾药业集团。无水
NaZs氏,HZS()4市售分析纯。
1.2方法
1
.
2.1中药的粉碎
称取中药材,粉碎,过40目筛。药粉用于
灵芝液体培养。
1
.
2.2接种培养
将药粉按一定比例加入250mL三角瓶中,
加入基础培养基溶解。121℃灭菌30min。冷
却后接入灵芝液体菌种,接种量10%。摇瓶条
件:三角瓶250mL,装液量70mL,30℃,转速
150叮min,培养时间7d。
1.2.3生物量的计算
发酵液经离心,沉淀,用水洗涤3次,再次
离心,沉淀,在105OC烘干至恒重,称得生物量。
1
.
2.4胞外多糖的计算
将发酵液离心所得上清液合并,减压浓缩
到发酵液体积的2/5一1/2,加95%乙醇到乙醇
含量为30%,4oC静置24h。离心,弃去沉淀,
向上清液中再加95%乙醇到乙醇含量达到
60%,4℃静置24h。离心,沉淀用60%乙醇水
溶液分散,再离心,弃去上清液,以此法清洗沉
淀,去除沉淀中夹带的少量单糖和低聚糖。沉
淀洗2次。再次离心后的沉淀用蒸馏水溶解并
定容到25mL,然后用浓玩s氏一苯酚法测多糖
含量。
2结果
2
.
1中药对生物t的影响
2
.
1
.
1不同品种中药对灵芝菌生物量影响的
比较
培养基中分别加入5味不同的中药,接种
培养后所得生物量如表1,其中的对照样为在
不添加中药的基础培养基培养的结果,其他条
件相同。从表1可见,加黄等、连翘和金银花的
样品生物量比对照样低得多,说明这些中药对
灵芝菌的生长可能存在抑制作用;麻黄和莱旅
子样品的生物量
.
比对照样高,说明这些中药对
灵芝菌的生长可能有一定的促进作用。
2.1.2中药用量的影响
在基础培养基相同的条件下,改变中药用
量,灵芝的生物量也受到影响。结果如图1
第一作者:硕士研究生。
收稿时间:2003一12一05.改回时间:2004一03一09
(46)(I,H)所示。
表1中药对生物t的影响
中药名称
加药量生物量
用量下不会抑制灵芝生长,而在0.6259/mL以
上则会显著抑制灵芝生长。
2.2对胞外多糖的影响
对生物量不会产生大的抑制作用的4味中
药对灵芝菌在液体培养下产生胞外多糖旱的影
响结果见表2。
表2中药对胞外多枯的影响
中药用量胞外多搪
中药名称
,于,,工R内J内、
……
内JLU弓JJ门‘,l‘U..立..1丹j八乙0000000朋00对照样
黄苹(R.“tel纽~)
金银花(月“肠nice。)
连翘(介“之。Fo移皿h二)
麻黄(E琳耐栩:动1ca腼Pf)
莱旅子(反~尺“刘巨爪)
45
4《)
对照样0318
金银花(月。:肠nicerae)100236
连翘(开uct“:Forsy之hzae)100229
麻黄(万助己己msinlcas勿pf)2001451
莱放子(menRaPhan£)1001177
从表2可见,金银花和连翘对灵芝胞外多
糖分泌量没有明显的影响,而麻黄和莱旅子能
成倍增加胞外多糖分泌量。
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中药用
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中药用量lg·L-,
图1中药用量对灵芝生物量的影响
从图1可见,随着5味中药用量的增加,生
物量均下降,表现为一定程度的抑制作用。但
是,加麻黄、莱兼子的样品虽然有随中药量增加
生物量下降的趋势,但生物量的绝对值却比不
加中药的对照样高。因此,这2味中药对灵芝
菌的生长可能同时存在促进因子和抑制因子,
促进因子使生物量比对照样的大,而中药用量
的增加,使抑制因子的作用增加,所以生物量下
降。加黄芬的发酵液生物量比对照样刁、得多,
说明抑制作用较强。连翘的用量达到1009/L
时有很强
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