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屠猪肌旋毛虫检鉴定与预防控制研究
屠猪肌旋毛虫检疫鉴定与预防控制研究
摘要:本文作者详细介绍了人畜共患肌型旋毛虫病的危害性,世界性分布状况,病原体形态特征、发育史对外界环境抵抗力,我国流行区域、因素分析;感染、途径、发病机制;人、猪临床主要症状;检疫现状及完善对策;检疫鉴定处理方法、程序、技术要点和预防控制措施。
关键词:旋毛虫;检疫鉴定;防控
引言
旋毛虫(Trichinella Spiralis)病,是一种常见的人兽共患寄生虫病。已有野生(狐、狼、野猪、貂、野鼠)、家养[猪、牛、羊(山羊)、犬、猫]等百余种哺乳动物自然感染。这些动物之间形成的食物链,使之成为人类的自然感染疫源。对人类身体健康和动物养殖业持续发展有较大的危害。严重影响肉类出口贸易。国际动物卫生组织(OIE)定为B类疫病,我国法定二类疫病。自该病发现至今已有200多年历史,呈世界性分布。近20多年来,世界上许多地区相继暴发,呈地方性、散发性流行。亚洲、欧洲、北美洲等国家发病率较高。猪肉、狗肉是人群发生旋毛虫病的主要污染源。旋毛虫病不仅列为我国三大人兽共患寄生虫病(旋毛虫、囊虫、棘球蚴)之首。而且是我国进出口肉类的首检、必检病种。并列入再度肆虐的疫病之一。规范检疫方法可及早发现疫情,并进行有效预防与控制,可保障人民群众食肉安全和生猪养殖业的持续发展。旋毛虫的检疫、鉴定与处理
1.1检疫方法
肌旋毛虫检疫方法有多种;目检法、压片镜检法或投影法、肌肉集样消化法、血清学方法、旋毛虫荧光染色法、激光扫描压缩标本等方法。全国生猪屠宰厂(场)大都采用目检法。大型肉联厂采用镜检法,也有采用以上两法相结合的方式,如有疑问再使用肌肉集样消化法。
1.1.1 目检法
1)操作程序:检疫人员首先在屠猪开膛后的横膈肌采取不少于259,作为检疫肉样。先查看膈肌表面的脂肪及肌膜,将肌肉纵向拉平,仔细观察先看后者深层肌纤维,寻找可疑的小白点。同时顺肌纤维方向剖开横膈肌角观察,见有脂肪样小点或露滴状病灶,即做好标记镜检。按不同部位的4个侧面用医用剪刀顺着肌纤维各剪取似米粒状6个小肉粒依次附贴于2块载玻片上,每块12粒,2块合计24粒以供镜检。
2)技术要点;在目检中,我们经常发现各种不同形状、色泽的小点病灶;形似卵圆针尖小白点、细长形枣核状小白点者多属典型包囊。钙化的包囊则在小白点中间有色深的小点。圆形者又类似囊虫的钙化小白点,钙化的包囊或虫体呈灰黄色,大小又似微尘状小点等等。因采样面积大,对成熟包囊或钙化虫体检出率高,但对有感染力尚未成熟的包囊的旋毛虫无法检出。
1.1.2镜检法
1)操作程序:将两块各有12粒肉样的载玻片合并为一,稍用力压扁后,置于放大50~80倍的显微镜或投影仪下观察;逐个检查24个肉样压片的每个视野。
2)技术要点;在镜检中,可见到形状各异的肌旋毛虫形态;外观形似针尖状小白点的,在显微镜下可见到包囊和钙化的虫体或包囊不清楚的旋毛虫。细长形枣核状小点的,镜检时可见细长似枣核状的包囊,囊中有淡黄色的虫体,卷眙螺旋状浮游于透明囊液内,易于同住肉孢子虫混淆。但后者无包囊。外观乳白色椭圆状脂肪样小点,镜检时清晰可见空包囊,双层或多层包囊的旋毛虫。有包囊的虫体,一般呈淡白或灰白色。镜检时可见虫体形态多样;如链条状、螺旋形、单环、双环螺丝形及其他形状。包囊形态不等;有空包囊、单层包囊、双层包囊、多层包囊。也有包囊不清楚的。偶见包囊中的活虫呈伸缩蜷曲状态。钙化的虫体其包囊不变形,一旦用10%盐酸溶液滴于肉样玻片上,5rain后镜检即可见到虫体或不完整崩解的虫体。外观圆形类似囊钙的小白点,镜检可见圆形包囊中的虫体。肌旋毛虫钙化的包囊由于病程不同,在镜检中也清楚可见不同状态;初为两端色暗,囊液与虫体可见;继之钙化囊内有石灰沉淀,视野色暗,但仍可见到虫体。最后的钙化则呈乌黑色的棱形或不规则形的钙盐块。仅隐约可见虫体。压片镜检法的缺点是不能检出寄生密度小于3条/g的肌旋毛虫病猪,不能检出未形成包囊的旋毛虫。
1.1.3肌肉集样消化法
1)程序:采样(横膈肌25~309)一捣碎一消化一集虫—镜检一复查处理。
2)操作方法:
①每头猪采肉样不少于259编号(与胴体编为同一号码)送旋毛虫检疫室。检疫员从每头猪肉样上剪取19小样,分别以10、50、100头为一组。
②肉样捣碎:将一组肉样的检样置于组织捣碎,原则要求是在不绞碎虫体的前提下,尽量使肌肉组织捣碎机捣碎。
③消化:使用磁力搅拌器在40~50C温度中搅拌消化,30min或同温下以80次/rain振荡,60~70min。
④集虫:离心沉淀。先在分液漏斗中沉淀30rain,放出40mL于离心管内离心lOmin,弃去30mL上清液,剩下lOmL倒入平皿内,先用50目筛,除去粗渣,再用100目筛过滤。
⑤镜检:使用80倍显微镜检查,如发现包囊虫体或钙化虫体,每组每次检出阳性达50%以上
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