人教版選修三专题1.23知识点.docVIP

1.1 DNA重组技术的操作工具 一、操作工具 （一）限制酶 来源：原核生物 特点：识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 结果：产生粘性末端和平末端 （二）DNA连接酶 分类：大肠杆菌DNA连接酶和T4DNA连接酶 作用于磷酸二酯键 （三）运载体 种类：质粒、动植物病毒、噬菌体衍生物 运载体要具备的条件：① 一个或多个限制酶切割位点② 自我复制能力③ 有标记基因 1.2 基因工程的基本操作程序 一、目的基因的获取： 1．目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的 结构基因___。 2．获取目的基因的方法 （1）从基因文库中获取目的基因 基因组文库 ②基因文库 cDNA文库 （2）利用PCR技术扩增目的基因。 ①PCR：是一项在生物体外 复制 特定DNA片段的核酸合成技术。 ②前提条件：已知目的基因的 核苷酸 序列。 ③原理：__DNA复制__ （3）人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。 二、基因表达载体的构建 （1）表达载体的组成：目的基因+ 启动子 + 终止子 +标记基因等。 （2）启动子：位于基因的 首端 ，它是 RNA聚合酶的 结合的部位，驱动基因转录产生mRNA。 （3）终止子：位于基因的 尾端 ，终止 转录 。 （5）标记基因： 鉴别 受体细胞是否含有目的基因。 （6）不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。 三、将目的基因导入受体细胞 方法：1．将目的基因导入植物细胞 (1)农杆菌转化法 (2)_基因枪法___ (3)__花粉管通道法____ 2．将目的基因导入动物细胞方法： 显微注射 技术。 3．将目的基因导人微生物细胞方法：用Ca2+处理细胞。 四、目的基因的检测与鉴定 （1）检测转基因生物的染色体的DNA上是否插入了目的基因 方法：__DNA分子杂交_____ （2）检测目的基因是否转录出了mRNA 方法: __DNA分子杂交_____ （3）检测目的基因是否翻译成蛋白质的 方法：____抗原-抗体杂交____ 1.4 蛋白质工程的崛起 1.基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。 2.蛋白质合成的过程：从预期的蛋白质功能出发，设计预期蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列。 3.蛋白质工程可以制造自然界中本没有的蛋白质。 2.1 植物细胞工程 一. 植物组织培养 1． 概念： 在（无菌 ）和（人工 ）控制条件下，将离体的器官、（组织）、（细胞），培养在人工配制的（ 培养基 ）上，给予适宜的培养条件，诱导其产生（ 愈伤组织 ）、从芽，最终形成完整的植株。 2． 过程（注：①②表示过程名称；③④表示培养基名称。） （ ① ） （ ① ） （ ② ） （ ③ ）（ ④ ） 外植体 ( ⑤ ) （ ③ ） （ ④ ） ①过程中主要是细胞的( 分裂 )；②过程中既有 ( 分裂 )，又有（ 分化 ）。 3．原理：（细胞全能性 ） 4．培养基 （1）形态：（ 固体 ）培养基 （2）成分：1）有机营养成分 2） 无机营养成分 3）激素 4）琼脂 （3）培养基中的有机营养物质通常是（蔗糖 ）。 （4）培养基中的无机营养物质包括（ 水 ）、（ 无机盐 ）。 5．植物组织培养中涉及到的激素种类及作用。 （ 生长素 ），作用是诱导细胞分裂和（ 根 ）的分化 ；（细胞分裂素 ），促进细胞分裂和（ 芽 ）的分化。 （ 赤霉素 ），刺激培养细胞的（ 伸长 ），使从芽或小植株快速长高。 6．判断题（相关概念的理解） （1）细胞再分化，是指已经分化的细胞失去其特有的结构和功能的过程。（F ） （2）在理论上植物的任何一个细胞都具有发育成完整植株的潜力。（T ） （3）生物的组织器官的不同，从根本上说是因为细胞中表达出的蛋白质的种类不同。（ T ） （4）植物细胞培养的结果只能是发育成完整的植株。(F) 二、植物体细胞杂交 1．概念：将（ 不同 ）种的植物体细胞，在一定条件下融合成（ 杂种细胞 ），并将其培育成新的植物体的过程。 2．原理：（ 细胞全能性 ） 3．过程：（1）去除（细胞壁 ），获得有活力的（原生质体 ）。方法：（酶解法 ），需要的酶（ 纤维素酶）、（ 果胶酶 ）。 （2）诱导（ 原生质体 ）融合。人工诱导方法：（物理法 ）、