现代生物科技专题专题2导论.pptVIP

[提醒]　(1)动物细胞培养中两次用到胰蛋白酶，第一次的目的是处理剪碎的组织使之分散成单个细胞，第二次的目的是使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。 (2)核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不完全相同的原因：克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本的卵细胞，与植物组织培养不同(只来自于一个亲本),即克隆动物遗传物质来自两个亲本;在发育过程中可能发生基因突变、染色体变异导致其性状改变;外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。 (2)动物细胞培养需要满足的条件 ①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 ②合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等天然成分。 ③温度：哺乳动物最适温度多是36.5 ℃±0.5 ℃；最适pH是7.2～7.4。 ④气体环境：95%空气＋5%CO2，其中O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 (3)原代培养和传代培养 ①原代培养： 可有两种表述：a.细胞悬液第一次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的细胞培养；b.第1代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代培养。两种表述没有本质区别。 ②传代培养： 同样有两种表述：a.细胞悬液培养一段时间后，分瓶再进行的细胞培养；b.传10代以后的细胞培养，统