黄病毒在蚊子中的研讨.pptVIP

果蝇hig是一种分泌型蛋白，特异的表达在神经系统中。 左下图显微注射：随后想看看denv的感染能否影响aahig表达。 * 与果蝇的hig不同 序列预测表明aahig缺少N端信号肽。为了看是否可以分泌，克隆全长的aahig 到表达载体后转染到果蝇s2细胞中。 表明aahig能够分泌并富集在质膜上。 E：为了确定aahig在中枢神经系统的精确定位，对蚊子大脑染色。Aahig分布在蚊子大脑的触角及视叶，并且富集在神经细胞表面。 * 为了表明aahig亚细胞定位，收集了雌性埃及伊蚊的大脑组织，分离出了核，线粒体 细胞质及质膜。特异染色表明aahig位于质膜部分。 * 作者重复了以前的文章中的dsrna介导的aahig沉默从而增强denv2 yfv的载量，胸腔注射aahig dsrna显著降低其表达。沉默3天后胸腔显微注射denv2。 为了排除dsrna介导 的rna干扰的脱靶效应以及后续确立aahig在黄病毒感染中的作用，作者通过胸腔接种aahig抗体来免疫封闭天然的aahig来进行功能研究。 为了评价抗体是否可以通过循环系统递送到蚊子大脑中，作者接种稀释过的鼠抗aahig抗体到蚊子胸腔，随后检测在蚊子大脑中的分布。右上：可见鼠抗aahig抗体分布在神经细胞表面。 右下：分布在接种蚊子的大脑 * 上i：一系列稀释的抗体与denv2预混 之后显微注射，aahig中和显著增强denv2感染性