HCV受體的研究进展.docVIP

丙型肝炎病毒受体的研究进展 第四军医大学微生物学教研室 吕欣 综述 薛小平 徐志凯 审校 摘要： 丙型肝炎病毒（HCV）受体一直是HCV研究的热点之一， 但至今仍无定论，已经提出的可能受体有：CD81、低密度脂蛋白受体、粘多糖、清道夫受体及C型（钙离子依赖型）凝集素DC／L－SIGN等，本文就上述与HCV相关分子的研究进展作一综述。 HCV是引发慢性肝炎的主要病原体之一，并有可能进一步发展成为肝硬化与肝癌，初步估计全世界约3%的人感染HCV。HCV的天然宿主只有人和黑猩猩，而且至今没有确立一株HCV 的敏感细胞系可以支持HCV在体外长期有效的复制，从而制约了HCV的相关研究。对有囊膜病毒而言，病毒囊膜糖蛋白与宿主细胞膜上特定分子的结合，是引发宿主受病毒感染的始动因素，受体决定了病毒的组织和细胞亲嗜性以及宿主范围。有关病毒受体的研究，已经成为当今基础病毒学和分子病毒学研究中最为活跃的领域之一。1998年Pileri等报道HCV 包膜糖蛋白E2 与人CD81分子结合，HCV的中和抗体在体外可以抑制病毒与CD81结合，推断CD81分子可能是HCV的受体[1]。在随后有关HCV受体的研究中，相继提出低密度脂蛋白受体、粘多糖、清道夫受体等作为HCV的候选受体。但迄今为止，HCV对宿主细胞的侵染机制尚无清楚的了解，而且意见不一。本文对近几年有关HCV 受体研究的进展作一综述。 1. CD81 CD81的结构与功能：CD81是膜相关蛋白，又称增殖抗体的靶抗原－1（TAPA-1），含有236个氨基酸，约26KD，属于四次跨膜超家族(TM4SF)。N端、C端均在胞浆内，四次跨膜形成2个疏水的细胞外环：EC1（SEL），EC2（LEL），各有28和80个氨基酸。CD81分布广泛，除中性粒细胞、血小板和红细胞外，在B细胞、T细胞、巨噬细胞、NK细胞、树突状细胞与嗜酸性粒细胞上都有表达。CD81在B细胞上与CD21、CD19、Leu13组成细胞信号转导复合物，通过抗原特异性识别和CD21介导的补体识别降低B细胞的活化阈值，还与MHCⅠ类分子、Ⅱ类分子、CD20、CD37、CD53、CD82等分子共价相连；在T细胞上CD81与CD4、CD8、CD82相连。影响多种细胞的粘附、激活、增值、分化及形态改变［2］。EC2是HCV E2与CD81的结合识别区，其中4个Cys形成的2个二硫键，对E2－CD81结合是必要的［3］。 1.2 CD81 与HCV 的相互作用：E2蛋白的C末端有一疏水序列，此区对E2蛋白具有膜锚定作用。删去此疏水区（C末端至少31个氨基酸）能够产生分泌型、可溶的E2 蛋白。在前体多肽氨基酸序列661处截断的分泌型E2 蛋白（E2661），仍可被E2构象依赖性单抗识别，与CD81 EC2的结合活性也比在688、704、715处截断的蛋白强，可能是E2661更好的维持了天然蛋白的构象，故而E2661在研究病毒与CD81作用时应用较多［4，5］。相对保守区的存在是配体与受体作用的必要条件，不同重组形式的CD81 EC2与E2661的结合作用不同，CD81的构象以及E2的正确折叠在识别结合中很重要，有证据显示E2的关键序列位于氨基酸480－493及544－551处，它们在不同的病毒亚型中保守［5，6］；但是去除了高变区HVR1（氨基酸384－410）的E2在结构上并没有明显改变，仍然可以和CD81结合［4］。人与非洲绿猴（AGM）的CD81 LEL上只有四个氨基酸（163、186、188、196）不同，但后者不与HCV E2结合。将人CD81上这四个位点的氨基酸突变，研究与E2661的相互作用后发现，188与196位的氨基酸对结合没有影响，F186是人CD81与E2及抗体结合的关键位点，将其突变为AGM的L后就丧失了与E2的结合能力，将T163突变为AGM的丙氨酸A，反而增加了与E2及抗体的结合作用，可能T163参与维持CD81的三级结构及与配体的结合［7］，表明单个氨基酸的改变对HCV E2与CD81的结合具有重要作用。 CD81是否为HCV受体目前尚无定论，一些学者提出CD81不是HCV的主要受体[8，9]，主要依据是:（1）CD81分子在体内分布广泛，许多不同的细胞表面都有表达，但HCV的细胞嗜性却并不广泛；（2）从感染患者体内获取的HCV，经蔗糖密度梯度离心纯化后与淋巴瘤细胞的结合，并不需要CD81的参与[10]；（3）长期以来，人们一直认为HCV与人和黑猩猩CD81分子的结合是特异的，具有严格的种属特异性。2000年Meola等［11］报道，通过ELISA法检测到E2蛋白与灵长类动物绢猴CD81的结合比对人的CD81更有效，绢猴与人的CD81 LEL仅存在5个氨基酸的差异（155、163、169、180和196），但绢猴并不