兒科呼吸道感染中的应用分析.docVIP

快速肺炎支原体和衣原体抗体检测在儿童呼吸道感染中的诊断分析 湖北省云梦县人民医院检验科 金银平 摘要：儿童呼吸道感染在住院患儿中占很大的比例，而支原体、衣原体感染在其中占20％左右，通过胶体金法准确快速检测肺炎支原体、肺炎衣原体抗体，为临床诊断提供依据。 关键词：肺炎支原体 肺炎衣原体 呼吸道感染 肺炎支原体、衣原体它是介于细菌和病毒之间的微生物，支原体、衣原体侵人体后，首先侵鼻咽部，继而侵气管，支气管。粘附在呼吸道上皮细胞表面的受体上引起肺部感染。是呼吸道感染的重要致病菌，并可造成家庭，社区流行［1］。本文就我院从2011年3月20日至2012年6月20日期间的我院儿科住院儿童，症状为流涕，鼻 试剂来源：肺炎支原体抗体检测试剂盒（胶体金法），肺炎衣原体抗体检测试剂盒（胶体金法），均由山东康华生物技术有限公司生产。 标本收集与处理：儿童住院后，抽静脉血作为标本，必须用没有加任何抗凝物质红色帽的真空采血管，把标本放置36.5°C的水浴箱中孵育1小时，放离心机中离心，获取血清标本，以上操作都要防止标本溶血 标本检测严格按照试剂的说明书进行，同时测定支原体、衣原体［2］。 标本来源都是本院的住院儿科病人，年龄最大的10岁3个月，最小的是出生后1个月，其中男孩1231例子，女984例。检查结果如下表格： 男孩1231例 女孩984例 总数2215例 支原体单项阳性 98例 8.0％ 89例 9.0％ 187例 8.4％ 衣原体单项阳性 26例 2.1 ％ 15例 1.5％ 41例 1.9％ 支原体，衣原体同时阳性 134例 10.8％ 117例 11.9％ 251例 11.3％ 支原体总阳性 232例 18.8％ 206例 20.1％ 438例 19.8％ 衣原体总阳性 160例 12.9％ 132例 13.4％ 292例 13.2％ 总阳性 258例 20.9％ 220例 22.5％ 478例 21.6％ 方法学分析：胶体金法检测标本的最大优势就是快速，平时工作中，检验工作人员总以为是最简单的检验方法，但胶体金法对检测人员的工作经验，操作的严谨，环境的影响，结果的准确判断分析，对检验人员都有严格的要求。操作前必须认真阅读试剂盒上的说明书，严格遵守操作规程。如室温必须是20---35°C。如试剂从冰箱中取出必须复温。因为抗原抗体反的最适反应温度是人体体温（37°C），而且低温下分子运动慢，抗原抗体反应不充分。有的实验室把标本室温放置时间过长或冰冻过，这样会影响抗体的效价下降，必须使用新鲜血清。不能用含有抗凝剂或促凝剂的试管，可能导致非特异性吸附增多，造成假阳性。如标本有高脂，乳糜状的标本，可以延长标本的离心时间。每步操作不等上步所加液体完全渗入即加下一步液体，可导致阳性率下降，各步操作必须紧紧相联，不能一步加完过一段时间再加下一步。要在规定的时间内报结果，超出规定时间报出结果无效［3］。更换试剂盒批号，必须做阴阳性对照，刚开始做阳性对照时，可以把阳性对照对 结果分析：在检测的结果，支原体阳性19.8％，衣原体阳性13.2％，支原体感染跟报道基本一致［4］，没有大的差别。无论是男孩还是女孩，支原体检测的阳远大于衣原体的阳性，证明感染中支原体高于衣原体。支原体和衣原体的阳性女孩都略高于男孩。支原体为20.1％＞18.8％，衣原体为13.4％＞12.9％。原因不是十分清楚，估计还下男孩的免疫力强于女孩。支原体、衣原体同时阳性大于单独的支原体，衣原体阳性，男孩：10.8％＞8.0％＞2.1 ％，女孩：11.9％＞9.0％＞1.5％，证明支原体、衣原体存在同时感染的可能，另外还存在可能只有其中一种感染，但胶体金法检测这两种抗体间存在有干扰。还要进一步分析。在2215个儿童中，不论支原体感染还是衣原体感染，只要有其中一项的是阳性有478例，占总数的21.6％。证明支原体、衣原体在儿科住院患儿呼吸道感染中占重要地位，是儿童呼吸道感染的重要病原体之一，必须引起重视。 胶体金检测支原体、衣原体抗体最重要的是快速，标本抽取后2小时内可出结果，比其它如ELISA法检测抗体要快速，PCR核酸检测快速、敏感、特异，但此法相当敏感［5］，一般实验室不容易操作，基层医院一般没有用PCR法检验测肺炎支原体、衣原体。胶体金法相对于ELISA法、PCR核酸检测易于操作控制，快速测定为临床诊断提供帮助。 参考文献： 1 顾兆坤 顾可梁主编 儿科临床与检验 上海医科大学出版社 1999（1）178-181。 2 康华生物 肺炎支原体抗体检测试剂盒（胶体金法）说明书2009--11--26。肺炎衣原体抗体检测试剂盒（胶体金法）说明 2010--3--12。 3 科华生物报 第26期 金标渗滤产品客户答疑 4 王慕逖 主编 儿科学 人民卫生出版社 2002（5）2