酶工程01酶作用基本原理摘要.pptVIP

(四)酶浓度对酶促反应速度的影响 因为V=K2[E] Vm=K2[E0] 所以V与E成正比 因为Vm不仅受[E]的影响,也受[S]的影响,故对于保证上述线性关系必须有两个先决条件: (1)一定是初速度,这也是测定反应速度的基本要求 (2)[S]一定要高,高到多少?([S]100Km) 酶浓度对酶促反应速度的影响 (五)温度对酶促反应速度的影响 1.酶反应的最适温度 定义 (2)各种动植物,微生物的最适温度 (3)温度对酶的双重影响 2.温度对酶稳定性的影响 温度对酶反应速度影响很大,,酶的热失活温度与蛋白质的变性温度很接近,即酶的热变性是酶蛋白变性的结果。 酶的稳定温度与作用时间、底物种类、酶浓度、酸碱性、抑制剂、激活剂等有关,所以酶的最适温度或稳定温度不是酶的特征性常数. (六) pH对反应速度的影响 1.酶反应的最适pH 2. pH为何能影响反应速度 (1) pH能影响酶活性中心的必须基团的解离状态,从而改变反应速度. (2)影响[ES]的解离. (3)影响底物的解离 (4)影响其他可解离基团的解离状态,从而影响其活性构象而影响反应速度. (5)过高过低的pH可引起酶蛋白的变性失活。 酶在最适pH时,必须基团处于最佳解离状态,适合与底物结合并催化底物,因此反应速度可达最大,否则反应速度下降。 3. pH稳定性 酶在一定的pH范围内是稳定的,超过这个范围就不稳定,易变性失活,酶的这种特性称为pH稳定性. A schematic diagram of the variation in the rate of an enzyme catalysed reaction (Vmax) with the pH of the solution. The centre (optimum pH) and breadth of this bell-shaped curve depend upon the acid dissociation constants of the relevant groups in the enzyme. It should be noted that some enzymes have pH-activity profiles that show little similarity to this diagram. 一些酶的最适 pH 值 9.8 精氨酸酶 7.8 核糖核酸酶 7.8 延胡索酸酶 7.7 胰蛋白酶 7.6 过氧化氢酶 1.8 胃蛋白酶 最适 pH 酶 (七)激活剂和抑制剂对酶促反应初速度的影响 定义 激活剂: 抑制剂: 激活剂分类: 1.无机离子 2.小分子有机化合物 3.蛋白质大分子 三. 双底物酶促反应动力学 为了便于对这类动力学进行讨论,通常按反应方式和历程分为两大类,即顺序机制和乒乓机制。 （一）顺序机制又叫序列机制,其主要特征是底物的结合与产物的释放有一定的顺序。根据酶和底物是否存在一定的前后顺序,有将它分为两类,即有序顺序反应和随机顺序反应。 : E+A EA+B EAB EPQ EQ E+Q P A叫做领先底物,B叫做随后底物,P叫第一产物,Q叫第二产物 许多以NAD+及NADP+为辅酶的脱氢酶类即属于此类酶. 1.序列有序机制(compulsory order mechanism) 有序机制是指:底物A和B和酶的结合有严格的顺序,一定是先A后B,产物释放也是先P后Q NAD+苹果酸 NADH+草酰乙酸 2.随机顺序机制 少数脱氢酶和激酶属于此类反应机制 (二)乒乓机制(ping-pong mechanism) 其特征为E与A结合生成复合体,产物P的脱离在另一底物B的加入之前,S与P交替地与E结合或从E释放,故称为乒乓机制. 属于此类的酶大多数是具有辅酶的,如转氨酶等.乒乓机制的速度方程为 反应机制的鉴别 以1/V对1/[A](或1/V对1/[B])作图 乒乓机制是一些平行线 顺序机制是各直线交于纵轴左侧的一点. 但此法不能区别有序和随机顺序机制 第二节 酶的抑制剂及其作用 一.概述 1.意义：理论上有助于阐明酶活性中心结构,催化机理,代谢途径,代谢调节,药物和毒物作用机理.实践上:治疗疾病,杀灭害虫,军事应用等. 2.抑制程度的表示方式 定义:抑制程度指受抑制后活性降低的程度 V0:无抑制剂时的反应速度 V1:有抑制剂时的反应速度 几种表示方式 (1)相对活力:a=V1/V0(以分数形式表示现在活力是原活力的几分之几