核酸2015概要.pptVIP

实验思路 动物肝组织 提取 （匀浆） 核酸 分离 （离心） 水解核酸 核酸沉淀物 糖、磷酸、碱基 分别鉴定 提取原理 1 三氯醋酸能沉淀蛋白质； 2 95%乙醇能溶解脂溶性物质； 3 10％的NaCl能使核酸变成可溶性的核酸钠； 4 95%冰冷乙醇能沉淀核酸钠盐； 氨基萘酚磺酸 浓酸 【鉴定的原理】 核糖 糖醛 + 3,5二羟甲苯 绿色复合物 3H2O 磷酸 + 钼酸铵 磷钼酸 还原 钼兰(兰色) 脱氧核糖 浓酸 ω-羟γ-酮戊醛 + 二苯胺 3H2O 兰色化合物 嘌呤碱 硝酸银 灰褐色沉淀 【操作】 1.制备匀浆 猪肝 + 沙 + 研磨匀浆 + 生理盐水 2.分离抽提 肝匀浆倒入刻度离心管 立即加入2%三氯醋酸4ml搅匀 静置3分钟后离心（ 4500r/m ，2分钟） 倾去上清液，沉淀中加入95%乙醇4ml搅匀 在沸水浴中加热至沸2分钟 取出冷却后离心（ 4500r/m ，2分钟） 取出冷却后离心（4500r/m，2分钟） 倾去上层酒精液，离心管倒置于滤纸上，倒干乙醇 沉淀物中再加入10%NaCl溶液4ml搅匀 再置于沸水浴中加热5分钟，用玻棒不断搅拌 取出冷却后再离心（ 4500r/m ，2分钟） 将上清液倒入小烧杯内 取等量95%乙醇，逐滴加入小烧杯 白色沉淀物，静置8分钟，转入离心管 再离心（ 4500r/m ，2分钟） 倾去上