基因突变和基因组、基因工程.docxVIP

第19讲 基因突变和基因重组基因突变概念：碱基对的增添、缺失（移码突变）碱基对的改变（碱基对替换突变）适用范围：所有生物原因：物理、化学、生物因素（外）；异常代谢产物（内）发生时期：细胞分裂间期特点：普遍性、随机性、低频性、有害性、不定向性结果：产生新基因意义：生物变异的根本来源，生物进化的原始材料育种应用:诱变育种实例：镰刀形细胞贫血症基因突变不一定引起性状改变突变发生在基因的非编码区突变发生在基因编码区的内含子原密码子与变后密码子决定一种氨基酸隐性突变基因重组概念：基因重新组合类型：减Ⅰ前期，非姐妹染色单体的交叉互换 减Ⅰ后前，同源染色体分开，非同源染色体自由组合 细菌的转化 基因工程结果：产生新基因型意义：生物多样性的重要原因，生物变异的丰富来源，生物进化的重要材料育种应用：杂交育种育种方法（P132）第20讲 基因工程生物A 提取某基因 修饰和改造 生物B基因工程的基本工具限制性核酸内切酶（“剪刀”）来源：原核生物作用特点：①切割外源DNA②识别双链DNA特定核苷酸序列（专一性）③识别序列两条链为回文序列作用过程：切割双链DNA每条链特定部位的磷酸二酯键作用结果：形成黏性末端或平末端识别序列越短，在DNA中出现几率就越大DNA连接酶DNA连接酶DNA聚合酶作用合成磷酸二酯键作用过程连接DNA片段的末端连接单个脱氧核苷酸成DNA长链作用结果形成重组DNA形成新DNA分子是否需要模板否是运载体常用运载体：质粒（主要取自大肠杆菌，真核生物如酵母菌体内也有）噬菌体、动植物病毒特点：①能在宿主细胞内稳定保存、大量复制，且对宿主生存无影响，便于目的基因的表达②有多个限制酶切点，便于与目的基因连接③具有标记基因，便于筛选基因工程基本步骤提取目的基因：①从基因文库中分离：基因组文库（所有DNA+质粒 受体菌群体）cDNA文库（所有mRNA反转录形成的DNA+质粒 受体菌群体）②PCR技术（DNA体外扩增技术或DNA聚合酶链式反应）③人工合成法构建基因表达载体目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代；使目的基因表达并发挥作用组成：目的基因+标记基因+启动子+终止子+复制原点步骤：①用限制性内切酶切割质粒，出现粘性末端②用限制性内切酶切割目的基因，出现相同的粘性末端③将质粒和目的基因结合成重组质粒注：限制性内切酶不一定种类相同，但是步骤①②切割后的黏性末端要相同将目的基因导入受体细胞（很少）受体细胞植物体细胞动物受精卵微生物细胞常用方法农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射法感受态细胞法（大肠杆菌+Ca2+）目的基因的检测和鉴定检测内容目的基因时候进入受体细胞目的基因是否转录目的基因是否翻译检测方法DNA分子杂交DNA和RNA分子杂交抗原-抗体杂交三、基因工程的应用抗虫、抗病、抗逆、改良转基因植物（植物基因工程）提高动物生长速度、改善畜产品品质、生产药物、转基因动物提供器官移植供体（动物基因工程）基因诊断（DNA分子杂交法、DNA探针法）基因治疗（植入正常基因）例：抗虫棉（苏云金杆菌——毒蛋白基因——棉花）胰岛素（人——胰岛素基因——大肠杆菌）ADA（腺苷脱氨酶）基因缺陷症的治疗（正常基因+病毒核酸——感染细胞——注射入患者体内）基因工程育种的优缺点：优点：目的性强、克服远源杂交不亲和的障碍缺点：技术复杂、可能引发生态危机（①生物多样性②基因扩散、基因飘逸③转基因植物残体分解物、根际分泌物对生态环境的影响）、制造生物武器p the right to recovery of principal and interest and costs; Waiver of recourse against the party of individual credit rights; Behavior of other claims against the Bank. The Agency shall, in accordance with the Banks records management systems requirements, regulate the collection, safekeeping of personal credit file, pay attention to the following risks: customers based on incomplete information; Review and approvalp the right to recovery of principal and interest and costs; Waiver of recourse against the party of individual credit rights