荧光PCR原理常用探针的优缺点及多重荧光PCR技术进展.docVIP

阐述荧光PCR原理、常用探针的优缺点及多重荧光PCR技术进展 摘要：荧光PCR技术是20世纪90年代中期发展起来的一种新型核酸定量技术。该技术具有实时监测、快速、灵敏、精确等特点, 是对原有PCR技术的革新, 扩大了PCR的应用范围。本文综述了荧光PCR技术的原理、常用探针的原理和优缺点，PCR技术的研究方向及其应用。 关键词：荧光PCR;探针;多重荧光PCR;应用 聚合酶链式反应PCR是一种体外扩增DNA片断的技术，根据扩增策略和检测产物手段的不同，可分为定性PCR和定量PCR。实时PCR( rea-l time quantitative polymerase chain react ion, RQ-PCR) 又称荧光定量PCR, 是由美国Applied Bisystems 公司于1996 年研制出的一种新型核酸定量技术, 并随着荧光PCR 仪的推出而逐渐得到广泛应用[ 1]。该技术在常规PCR 基础上运用荧光共振能量转移现象( fluorescence resonance energy transfer, FRET) 技术, 加入荧光标记探针, 巧妙地把核酸扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起, 在PCR 指数扩增期间通过连续监测荧光信号的强弱来即时测定特异性产物的量, 并据此推断目的基因的初始量[ 2] 。 1.荧光PCR的原理 荧光PCR技术是指在普通PCR反应