协和医学院2011基因分子生物学复习资料.docVIP

基因分子生物学期末复习题总结（选择和填空各五十分） (闭卷的话只背这些就够了,然后认真看出填空题的老师的课件) 一． control of prokaryotic gene expression（原核） Ⅰ名词 1. Operon 操纵子，是基因表达调控的基本单位，包含结构基因、操纵基因等一些相邻基因组成的DNA片段，其中操纵基因可被调节蛋白识别并调控，结构基因的表达又受到操纵基因的调控。 2. Inducible operon 可诱导操纵子，当环境出现某一小分子时，与代谢相关的基因表达，即诱导物所诱导的操纵子为可诱导操纵子，如lac操纵子，在诱导物作用下可产生本身代谢所需要的酶。 3. Operator 操纵基因，是操纵子结构基因前的DNA区段，可以结合阻遏物或活化物。常位于基因启动子的后面或与启动子重叠，可控制临近结构基因的表达。 4. Co-repressor辅阻遏物，阻遏蛋白与某一个小分子结合后活性被激活，阻止产生合成这种小分子相关的酶，那么这种小分子称为~~，例如色氨酸。 5. Repressible operon 可阻遏操纵子，共阻遏物所抑制的操纵子为可阻遏操纵子，即共阻遏物的存在可以抑制结构基因所编码酶的表达，如trp操纵子等氨基酸合成相关的操纵子。 6. Attenuator 衰减子， 是E. coli Trp操纵子一段特殊的调控序列。位于上游启动子与第一个结构基因之间，是Trp操纵子含有的一个特殊调节序列，色氨酸操纵子的前导序列有4个关键区，当大肠杆菌细胞中色氨酸水平较高，核糖体迅速的翻译前导序列中的序列1，生成14肽，并在转录序列3之前占据序列2转录产物，以致前导序列转录产物序列3和序列4互补，形成类似终止子的衰减子结构。. 7. Alarmones 信号素，原核生物应急反应中所产生的信号分子，ppGpp or pppGpp(鸟苷4/5磷酸),它们通过与靶蛋白的结合来改变其活性即刻产生调控作用，从而对代谢做出调节。 8. Prophage 原噬菌体，某些温和噬菌体侵染细菌后，其DNA整合到宿主染色体上，处于整合状态的噬菌体DNA为原噬菌体。它是繁殖和传递噬菌体本身遗传信息的一种重要方式。 9. Riboswitch 核糖开关，是原核生物中一类调节RNA元件，它可以直接感受小分子的代谢来控制转录和翻译，是不依赖调控蛋白的一种调节方式。 10. sRNAs 细菌内小RNA，sRNAs是细菌内长80~100 nt的RNA调控序列。它们一般不由大的RNA前体形成，而是被自身基因所编码产生。大多数的sRNA通过与靶mRNA配对来抑制转录，有些情况也促进转录。 11. Antisense RNAs反义RNA，由+DNA链转录产生。一个RNA可以与某一个基因转录出的mRNA互补，那么这个RNA则称为此mRNA的反义RNA，抑制mRNA的翻译，主要在翻译水平上调节基因表达的一种RNA（少数可调节其转录）。 Ⅱ简答 1. 简述lac operon的调控机制。 Lac操纵子由操纵基因O、结构基因Z、Y、A及调节基因组成。lac操纵子在启动子的-35区缺乏UP元件，为弱启动子。CAP和Repressor分别通过影响RNAP与启动子的结合来对lac基因进行调控。是通过CAP蛋白的正调节和Repressor的负调节这两种调节来实现的 当葡萄糖和乳糖都存在时，由于葡萄糖的存在，细胞中的cAMP 的水平则会降低，而cAMP对CAP的活性是必须的，所以此时CAP无活性，不能和CAP site 结合；而由于乳糖的存在，它可以与Repressor结合使其构象改变，从而不能结合在operator上，此时RNAP结合在启动子上，由于lac gene 的启动子是弱启动子，在没有CAP蛋白结合时，RNAP与之的结合比较弱，处于基础水平转录； 当只有葡萄糖存在时，此时CAP 蛋白依然没有活性，不能和CAP site 结合；由于没有乳糖存在，此时阻遏蛋白结合到操纵基因上，启动子和操纵基因有重叠区，Repressor的结合阻止了RNAP与启动子的结合，阻止了转录的发生； 当只有乳糖存在时，cAMP浓度升高，此时CAP与cAMP结合，表现出较高的活性，结合于CAP site；此时乳糖与repressor结合，使其构象改变，不能结合在operator上，RNAP则可与启动子结合；而CAP蛋白具有募集作用，可以帮助RNAP结合到启动子上，从而使得转录水平大大升高； 当两种糖都不存在时，CAP 可以结合到CAP site上；同时repressor也结合到operator上，阻止RNAP 的结合，阻止基因的转录。 2. 如何利用实验证明CAP蛋白的作用机制。 CAP蛋白的作用机制是募集RNAP到启动子上，可以用激活蛋白旁路实验来证明。 1）用蛋白与蛋