第三章 细胞生物学研究方法 Chapter 3 Techniques in Cell Biology 第一节 显微技术 细胞生物学的建立和发展得益于光学显微镜的发明; 电子显微镜的发明使对细胞结构和功能的研究达到了新的水平。 光学显微镜与电子显微镜的主要差别在所使用的光源不同,但分辨率却相差非常大: 光学显微镜的最大分辨率:0.2μm 电子显微镜的分辨率:0.2nm 一、显微镜的成像原理 所有类型的显微镜,镜像的形成都需要3个基本要素: 1、照明系统; 2、被观察的物品; 3、聚焦成像的透镜系统 照明系统的波长是显微镜成像的重要因素,因为波长能决定被检测物体的最小极限,波长越长,波幅的跨度就越大,所能观察到物体的极限就越大。 1、分辨率(Resolution) 是指能分辨出相邻两个物点间的最小距离的能力。 一般规定:显微镜或人眼在25cm明视距离处,能清楚分辨被检物体细微结构最小间隔的能力,称分辨率。 分辨力可用公式计算: R=0.61λ /N.A. N.A.=nsinα 式中: λ =波长;n=介质折射率;α=镜口角(标本对物镜镜口张角的1/2),N.A.=镜口率(numeric aperture)。镜口角总是要小于90?,sin α 的最大值小于1。 2、最大分辨率 R值越小,分辨率越高,即需要
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