4分子杂交及基因芯片技术.pptVIP

Array 用尼龙膜作固体支撑表面，将目标基因 DNA排列在膜的表面并固定。 杂交方法与常规Southern杂交相同。即mRNA反转录32P或33P标记的cDNA作探针进行杂交。 这种方法经典，稳定，但密度低，8×12cm的膜可点4×384=1536个基因。 Expression decreased Expression increased B Minghui 63 leaf: no pathogen inoculation Minghui 63 leaf: inoculated with Magnaporthe grisea, V86013 for 5 days A A B Microarray 用经特殊处理的玻璃片（载玻片）作固体支持表面，将目标基因 DNA 排列在玻片表面并固定。 探针采用多色荧光标记。 其特点是，密度高、制作方便，是目前应用最广泛的基因芯片之一。 1cm2可以固定3000-10000个点。 DNA chip （Affymetrix公司) 在玻璃或朔料表面经光化学处理，运用固相合成技术在固体表面直接合成各种不同的寡聚核苷酸（一般为20bp）。 探针采用多色荧光标记。 其特点是，密度可高达40万个寡核苷酸/1.6cm2。 原位合成芯片示意图 第二十轮合成 A A G c G T 第一轮合成 A G A G c T 第二轮合成 c