第十章 毒理学实验基础_培训课件.ppt

七、实验动物染毒和处置 尽可能模拟人接触毒物的方式 不同途径的吸收速率为：静注＞吸入＞ 肌注＞ 腹腔注射＞ 皮下注射＞ 经口＞ 皮内注射＞ 其他 （一）染毒 经口染毒：（1）喂饲、（2）灌胃、（3）吞咽胶囊； 经呼吸道染毒：（1）静式吸入染毒、（2）动式吸入染毒 经皮肤染毒： 注射染毒：尾静脉、肌注、皮下、腹腔 实验动物染毒和处置 针对一种外源化学物，如何选择染毒方式? （二）生物标本采集 生物标本采集：（1）血液（终末、非终末采血）、（2）尿液采集、（3）胆汁采集、（4）粪便采集. 麻醉：短效、中效、长效麻醉剂使用--；麻醉过程观察. 安死术：p129. 病理解剖和样标本留取：(1）大体解剖、（2）组织病理学检测. 实验动物染毒和处置 八、毒理学实验的统计学基础 统计学要点： 实验设计遵循原则：随机、重复、对照. 包括： （1）剂量水平数目及间隔； （2）每个剂量点的实验单位数，实验单位确定要保证样本的独立性、代表性； （3）对照设置； （4）非实验因素条件的均一性：样本足够数量、适当重复、盲法观察等。 结果统计分析：方法选择，可用不同方法处理. 毒理学实验结果评价 结果评价需要解决的问题 是否具有统计学意义 是否具有生物学意义 是否具有毒理学意义 具有统计学意义是判断生物学意义的必要条件之一； 判断生物学意义时要：（1）纵向比较：剂量-反应关系； （2）横向比较：其它相关参数是否改变； （3）与历史对照比较 毒理学意义需要专家评价 九、优良实验室规范Good Laboratory Practice-GLP GLP专指毒理学安全性评价实验室的管理，是实验室质控要求，保证数据科学性、准确性、公正性。 要求：1）组织体制及责任体制明确化；2）试验、操作规程的标准化；3）按照计划、操作规程实施试验；4）保存标本、记录；5）积极地保证可信性。 GLP基本精神是全面质量管理 化学品安全性评价遵循GLP原则是国家法规要求的 GLP认证单位 第十章 毒理学实验基础 一、毒理学实验的原则 二、毒理学实验的目的 三、实验动物的选择和处置 四、剂量设置和对照 五、结果处理 教学目标 1.掌握食品毒理学实验的原则和局限性 2.掌握实验动物选择的基本原则 3.掌握食品毒理学实验设计的三大原则 4.了解量反应资料和质反应资料的统计方法 一、毒理学实验的原则和局限性 化学物在实验动物中产生的作用可以外推于人：（1）人是最敏感的动物；（2）人和实验动物的生物学过程包括化学物的代谢，与体重或体表面积相关。 实验动物必须暴露于高剂量，这是发现对人造成潜在危害的可靠方法。 染毒途径的选择，应尽可能模拟人接触该受试物的方式 毒理学实验的局限性--动物实验结果外推到人的不确定性 动物与人对外源化学物的反应敏感性可能不同，甚至存在质的差别； 使用少量动物、采用较大剂量，使对群体的代表性较差，可能造成高剂量与低剂量的差异； 动物数量较少，对低概率毒效应难以发现； 实验动物为纯系，成年动物，反应较单一，与接触人群的复杂性不匹配，对外源化学物的易感性存在差异。 二、毒理学实验的目的 受试物毒作用的表现和性质（描述毒理学） 在急性或慢性实验中观察动物异常，发现有害作用 剂量-反应（效应）研究 毒性评价和安全性评价的基础；得到多种毒性参数和剂量-反应（效应）线的斜率 确定毒作用的器官 阐明毒作用特点，为机制研究和毒性防治提供线索 确定损伤的可逆性 通过动物对外源化学物的毒性反应，向人外推， 以期评价化学物对人的危害和危险性 三、动物实验的职业道德 一般原则 人道主义的管理和处理 使痛觉和不适感减到最小 避免不必要的使用动物 3R 原则 replacement替代：用无知觉材料的科学方法替代有知觉脊椎动物的方法 reduction减少：保证数据信息前提下，尽量减少动物使用数量 refinement优化：必须使用动物时，减少非人道程序的影响 实验动物：指经人工培育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，可用于科学研究的动物。 四、实验动物的选择 （一）物种选择 基本原则： 对外源化学物的毒性反应及代谢特点与人类接近的物种（很难满足）； 自然寿命不太长的物种； 易于饲养和实验操作的物种； 经济并易于获得的物种。 常规实验选择两个物种，分属： 啮齿类 非啮齿类 大鼠 小鼠 兔子 豚鼠 豚鼠：特点是毛短而光滑，生长快，抗病力强，繁殖性能好。广泛用于药物学、传染病学、免疫学、营养学、耳科学等各项医学及生物学的研究中。 C57BL/6J小鼠：黑色，对放射物质耐受性强，但照射后肝癌发生率高。眼畸形，对结核杆菌有耐受性嗜酒精性高，是肿瘤学、生理学、遗传学研究常用品系。 SD大鼠：白色，产仔多，生长发