植物细胞工程(中国i药科大学生物工程所有课件).pptVIP

酶联免疫吸附法(ELISA) Western杂交 β-D-葡糖醛酸糖苷酶的组织化学定位分析、 β-D-葡糖醛酸糖苷酶的荧光分析、 β-D-葡糖醛酸糖苷酶的化学发光分析 荧光素酶分析。 定量实时PCR(quantitative real-time PCR)术 通过荧光报告物对PCR反应对基因组中的某个单拷贝基因进行实时检测转基因的拷贝数。 PCR产物量与起始模板量成正比。 2 表达分析的方法 Outline 植物细胞工程基本概念： 定义 内容 植物细胞培养特性。 植物细胞一般培养技术 植物细胞营养需求 培养方式 培养条件 植物细胞种质保藏。 植物细胞原生质体培养技术 原生质体制备 培养方法及其再生 原生质体培养意义。 植物原生质体融合技术 促融因素 融合过程 杂种细胞筛选技术。 植物细胞大规模培养技术 培养方式 培养条件 影响培养的因素。 植物转基因技术 了解植物基因转化的受体系统 掌握植物细胞转化方式。 1、 直接筛选法 有新表型或感观上出现可测定的差异进行选择的方法 2、间接筛选法 用与突变表现型具有某种相关的特性为指标筛选 硝酸还原酶缺陷型细胞突变体，培养基加入氯酸盐，酶作用下产生次氯酸， 3、绿岛法 在植株上使叶面细胞产生突变并创造选择压力，令抗性突变细胞正常生长形成绿色斑点，谓之“绿岛”，切下绿岛