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Chelex 法提取血液（斑）DNA 原理: Chelex 是由苯乙烯与二乙烯苯的共聚体组成的螯合树脂，其亚氨基二乙酸侧链起着螯合金属离子的作用，防止在其煮沸过程中DNA 的降解，在高温低离子强度下也起着催化DNA 释放的作用。 对检材的条件要求 液体血用EDTA 溶液（0.5M EDTA：血=50μl：3ml）或枸橼酸钠溶液（2.5%枸橼酸钠：血=1：4）抗凝，勿用肝素抗凝，须冷藏保存送检。 操作步骤: 1、取4μl血液（或3×3mm2血斑样品）放入0.5ml的离心管中，加入0.5ml纯水，振荡混匀，室温浸泡15-30 分钟。 2、13,000rpm 离心3 分钟，去除上清液〔上清液可用于做抗人血红蛋白（FOB）金标试剂条检验〕，若是血斑则保留载体。 3、加入200μl 5% Chelex-100 溶液，56oC 保温15-30 分钟，振荡5-10 秒。 4、沸水中煮8 分钟（或在热循环仪上100oC 保温8 分钟），振荡5-10 秒。 5、13,000rpm 离心3 分钟，4oC 保存备用。 注意事项： 1、5% Chelex-100 溶液使用前摇匀，用量视检材的量而定。 2、液体血用EDTA 溶液（0.5M EDTA：血=50μl：3ml）或枸橼酸钠溶液（2.5%枸橼酸钠：血=1：4）抗凝，冷藏送检。 3、液体血涂在滤纸或脱脂纱布上制成血斑时，应在室温下自然晾干，放入纸袋内送检。 4、血斑应保留载体，皮革上的血迹最好用纱线转移提取。 5、纯水洗一次后，若颜色还很红，可用水再洗一遍。 6、微量血斑可不经水洗，直接加入适量5% Chelex-100 溶液保温。 7、陈旧血斑可加入蛋白酶K，并适当延长保温时间。 Chelex 法提取唾液（斑）DNA 适用范围： 该方法适用于各种载体上的唾液斑，常见的有口腔拭子、烟蒂、邮票、信封折口、 牙刷、果核、饮料罐、水杯、面罩及咬痕等。 原理： Chelex 是由苯乙烯与二乙烯苯的共聚体组成的螯合树脂，其亚氨基二乙酸侧链起着螯合金属离子的作用，防止在其煮沸过程中DNA 的降解，在高温低离子强度下也起着催化DNA 释放的作用。在Chelex 中加入蛋白酶K，有助于口腔上皮细胞的消化。 操作步骤 1、取3×3mm2唾液斑样品（过滤嘴纸质外层、唾液斑转移纱线）或剪取牙刷刷毛1束，放入0.5ml的离心管中，加入0.5ml纯水，振荡混匀，室温浸泡15-30 分钟。 2、13,000rpm 离心3 分钟，去除上清液，保留载体。 3、加入100μl 5% Chelex-100 溶液和5μl 2mg/ml 蛋白酶K，56°C 保温2 小时以上， 振荡5-10 秒。 4、沸水中煮8 分钟（或在热循环仪上100°C 保温8 分钟），振荡5-10 秒。 5、 13,000rpm 离心3 分钟，4°C 保存备用。 注意事项： 1、多枚烟蒂应分别放入不同纸袋内送检，标明商标和提取地点。 2、口腔拭子应在室温下自然晾干，放纸袋内送检。 3、饮料罐、水杯口上的唾液斑可分两步提取转移，先用湿棉签或纱布擦拭，再用干棉签或纱布擦拭，一并放入离心管中提取DNA。擦拭时尽量少用载体。 4、对于量少的检材可不经水洗，直接加入5% Chelex-100 溶液和蛋白酶K 保温。 Chelex 法提取组织DNA 适用范围： 人体的各种器官组织如心脏、脑、肌肉、软骨及毛根等。 原理： Chelex 是由苯乙烯与二乙烯苯的共聚体组成的螯合树脂，其亚氨基二乙酸侧链起着螯合金属离子的作用，防止在其煮沸过程中DNA 的降解，在高温低离子强度下也起着催化DNA 释放的作用。在5%的Chelex-100 中加入蛋白酶K 溶液，有助于组织细胞的消化和DNA 释放。 操作步骤 1、剪取组织约1mg，放入0.5ml 的离心管中，加入200μl 5% Chelex-100 溶液和10μl的2mg/ml 蛋白酶K；剪单根毛发的毛根，加入50μl 5% Chelex-100 溶液和5μl 2mg/ml的蛋白酶K，56oC 保温2 小时以上，振荡5-10 秒。 2、沸水中煮8 分钟（或在热循环仪上100oC 保温8 分钟），振荡5-10 秒。 3、13,000rpm 离心3 分钟，4oC 保存备用。 注意事项 1、焚烧的尸体应取深层肌肉，严重腐烂尸体应提取软骨。 2、多根毛发的毛根应分别提取DNA。 3、带毛根的毛发干燥状态下保存送检，组织应冷冻保存送检。 4、组织DNA 含量较大，取材时不要过量。 5、若组织表面较脏，应先用纯水冲洗，去除烟尘、泥土等杂质。 6、毛根表面若粘有血迹或其他斑迹，应先用脱脂棉蘸纯水擦拭干净。 Chelex 法提取指（趾）甲DNA 适用范围 该方法适用于人类指（趾）甲。 原理 指（趾）甲的主要成份为α-角蛋白，也含有人体细胞。