植酸酶耐热性评价方法研究.docVIP

植酸酶耐热性评价方法的研究 制粒对植酸酶活性的影响一直是限制植酸酶进一步推广应用的重要因素,针对这一问题,目前解决的方法有提高植酸酶添加量、包被技术、采用液体植酸酶制粒后喷涂技术、通过微生物菌株遗传改良开发耐高温植酸酶产品等。不管是哪种途径,制粒对植酸酶活性的影响是不可避免的,有效评价制粒过程中植酸酶活性的损失具有重要的应用价值。研究旨在系统比较水浴法、干热法和湿热法在评价植酸酶耐热性的效果,并比较同一温度条件下水浴法、干热法和湿热法测定结果与实际调质和制粒加工处理条件下的测定结果,来筛选相对科学、更能反映实际调质和制粒对植酸酶活性影响的实验室评价方法。 1 材料与方法 1. 1 试验材料 试验用植酸酶A、B、C来源于目前市场上具有代 表性的产品,其中植酸酶A来源于真菌;植酸酶B来 源于细菌;而植酸酶C来源于真菌,但经过了包被处 理。 1. 2 试验方法 水浴法:正确称取酶样品0. 8 g,转移到100 mL 容量瓶中,用含有吐温-20的乙酸缓冲溶液定容至 100 mL,提取45 min。待溶解混合完成后,分别取3 个10 mL离心管,分别取1 mL上述溶液转移到离心 管中,再用含有吐温-20的乙酸缓冲溶液定容至 10 mL,分别置于70, 80, 90e水浴锅加热10 min (5 min预热, 5 min加热处理),取出用于测定高温处 理后溶液中植酸酶活性。 干热法:用称量