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武汉轻工大学 本科毕业设计（论文） 白杨无性系茎尖培养及 体细胞胚胎发生技术研究 论文作者： ⅩⅩⅩ 指导教师： ⅩⅩⅩ 学科专业： 所在院系： 2013年6月 摘 要 本论文采用茎尖培养三步法，首次对引入我国表现优良的8个白杨无性系，进行了微体快繁，为今后系统的苗期测定及田间试验提供了材料。同时，选用了5个无性系，以水培苗或组培无菌苗为材料，进行愈伤组织诱导或对其发育状态调控及体细胞胚胎发生研究，为建立稳定的杨树体细胞胚胎发生体系奠定了基础。 试验结果表明，以水培苗带芽茎段为茎尖培养材料，银白杨与大齿杨杂种AG和美洲山杨与欧洲山杨杂种3#芽分化率显著低于其余6个无性系；垂直接种可显著提高水培苗腋芽分化率；玉米素浓度对芽分化率影响不明显，但影响材料的离体器官发生表现；8个无性系皆易诱导生根，其中银白杨与大齿杨杂种AG和灰杨Ca较其它无性系更易，选用根数作为评定生根效果指标更合适。 4-D高浓度悬浮培养下，成功的将美洲山杨与欧洲山杨杂种3#叶柄愈伤组织调节为胚性状态，通过细胞悬浮培养，获得了大量的球形胚，并首次观察到灰杨Ca茎尖白色愈伤组织内起源的子叶胚形成，得到了完整植株。基因型和4-D浓度对愈伤组织状态调节，至为关键。温度变化可影响茎尖形态发生。愈伤组织达到胚性状态时，表面特征不一致，但有产生胚性细胞能力强弱之分。