荧光光谱的原理及应用汇总.ppt

荧光光谱的原理及应用 主要内容 荧光光谱的基本原理 荧光光谱的应用 定量方法 Y. K. Park, et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2007 (46): 8230-8233 2.客体分子的影响： 金属-有机配合物（MOF）发光的影响因素 Zhe-Ming Wang, Song Gao, et al., Inorg. Chem., 2007 (46): 1337-1342 3.结晶水的影响 金属-有机配合物（MOF）发光的影响因素 M. D. Allendorf, C. A. Bauer, et al., Chem. Soc. Rev., 2009 (38): 1330–1352 4.配体共轭程度的影响 π* n orπ 配体 金属 配体 金属 发射 增大共轭 发射 能级跃迁示意图 金属-有机配合物（MOF）发光的影响因素 5.溶剂的影响 M. C. Hong, et al., Cryst. Growth. Des., 2008 (8): 2721-2728 金属-有机配合物（MOF）发光的影响因素 Avelino Corma, Jo?o Rocha, et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2009 (48): 6476-6479 6.pH的影响 金属-有机配合物（MOF）发光的影响因素 Guo-Cong Guo, et al., J. Am. Chem. Soc., 2009 (131): 13572-13573 7.激发波长的影响 金属-有机配合物（MOF）发光的影响因素 稀土掺杂发光材料 1.稀土掺杂激光晶体 2.稀土掺杂纳米材料 稀土掺杂激光晶体 稀土掺杂激光晶体 稀土掺杂激光晶体 稀土掺杂激光晶体 稀土掺杂纳米材料 稀土离子和半导体纳米晶本身都是很好的发光材料。 稀土离子的发光可以被半导体的激子复合所敏化，使得稀土离子的发光效率大大增强。 通过控制合成半导体纳米晶的尺寸来剪裁半导体的带隙以匹配发光中心的激发态能级，实现高效能量传递或发光。 稀土离子是最好的对结构敏感的光谱探针，可以设计实验来原位探测某些很小的半导体纳米晶室温结构相变过程并分析其内在机制。 稀土掺杂半导体纳米材料在绿色照明光源、纳米光电子器件、平板显示、纳米生物标记和传感器等方面有着广阔的应用前景。 稀土掺杂纳米材料 ZnO:Eu3+ ZnO→Ln3+ 能量传递 ZnO 敏化发光更高效 基质敏化的稀土离子发光 与蛋白质或其他大分子结构非共价相互作用而使一种或几种荧光性质发生改变的小分子物质。可用于研究大分子物质的性质和行为。 荧光探针 目前常用的荧光探针有荧光素类探针、无机离子荧光探针、荧光量子点、分子信标等。 荧光探针除应用于核酸和蛋白质的定量分析外，在核酸染色、DNA电泳、核酸分子杂交、定量PCR技术以及DNA测序上都有着广泛的应用。 荧光探针： 荧光探针 过渡金属配合物很多能实现较强的红外波段宽带发射，可以有效避开组织体的吸收，可以穿透组织体实现红外成像，克服同位素原子示踪对人体的伤害；寿命处于μs 量级，可以用于较大分子的形变和转动扩散研究，当然，结合其特有的发射波段也能对活体环境中的许多扩散和转变过程进行研究。 稀土离子是一类核酸探针的检测试剂。 在水溶液中仅有Tb(Ⅲ)和Eu(Ⅲ)发出荧光，与DNA配合后仍保留荧光性能，可特异识别核苷酸。 Tb(Ⅲ)和Eu(Ⅲ)与一些小分子配体配合，由于配体本身性质、中心离子-配体成键及溶剂等因素影响，使配合物的激发态寿命达到ms 级，并发出窄而强的荧光。 Tb(Ⅲ)和Eu(Ⅲ)与小分子的配合物探针通过共价键与靶DNA 共价结合后多用于实时定量荧光PCR 反应产物的分析及杂交测试。 该类探针要求稀土配合物易于合成并且足够稳定，同时荧光发射强度大。Nurmi 等用Tb(Ⅲ)和Eu(Ⅲ)标记的探针进行实时同步扩增及前列腺特异抗原的测定，信噪比要高于传统的TaqMan 探针，而循环阈值则降低。 荧光探针 量子产率 一般情况下，荧光量子产率（?)不随激发光波长而改变，这被称为Kasha-Vavilov规则。但如果形成的激发态会导致化学反应或系间窜越与内转换的竞争，则可能使?受到影响。例如，在低压气相以254 nm的光激发苯， ? = 0.4，而当以小于240 nm的光激发苯时，则未检测到荧光。这是由于苯的高振动能级的S1态会使其转变为杜瓦苯。不同化合物的?差别可以很大。 另外，?还会受环境（如温度、溶剂等）的影响，例如，降低温度可导致一个化合物的?增大，提高温度可导致一个化合物的?降低。 量子产率 由于荧光的非单色性、各向的不均匀性和二级发射等原因，荧光量子产率的直接测定的重复性往往较差。因此，实际测量中大多采用的是相对法，即用一已知其荧