第9章吸光光度法学案.ppt

灵敏度高 ：检测下限达到10-5~10-6 准确度 能够满足微量组分的测定要求： 相对误差2～5％ 操作简便快速 应用广泛 吸收光谱 吸光度A：每一波长下溶液对光的吸收程度 吸收曲线：纵坐标为A，横坐标为λ，即可得吸收曲线，它描述了物质对不同波长光的吸收能力。 最大吸收波长λmax 9.1.2 光的吸收基本定律: 朗伯-比尔定律 摩尔吸收系数ε的讨论 1) 单色光: 应选用?max处或肩峰处测定 2) 吸光质点（分子或离子）形式不变：离解、络合、缔合会破坏线性关系， 应控制条件(酸度、浓度、介质等) 3) 稀溶液： 浓度增大，分子之间作用增强 例： 邻二氮菲分光光度法测Fe2+。 ?(Fe2+) =5.0 ×10-4 g·L-1, b=2cm , 在波长 508nm处测得A=0.19，计算a和ε 。 解： 吸光度的加合性 单色光：具有单一波长 的光。 复合光：具有不同波长的 光复合在一起。 1、非单色光引起的偏离 ● 吸光质点间相互作用引起的偏离. §9.2 光度计及其基本部件 分光光度计的主要部件 光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强 度,稳定。 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm) 棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同 吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池 紫外区：石英池 检测系统：利用光电效应，将光强度转换成 电流讯号。 检测器：光电池，光电管，光电倍增管 显示器：低档仪器：刻度显示 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录 9.3.1显色反应的选择 *反应生成的有色化合物组成恒定，稳定。 9.3.2 显色条件的选择 2. 酸度（cM、 cR一定） 3. 显色温度 5.干扰的消除（本身具有颜色或与显色剂作用） 9.3.3 显色剂 §9.4 吸光度测量条件的选择 9.4.2 参比溶液的选择 9.4.3 吸光度读数范围的选择（准确度—仪器测量误差） §9.5 吸光光度法的应用 二、酸碱离解常数的测定 三、 配合物组成及稳定常数的测定 c(R) c(R) 1. 显色剂用量（cM、pH等条件固定） Mo(SCN)32+ 浅红 Mo(SCN)5 橙红 Mo(SCN)6- 浅红 M + R→ M R 副 反 应 M + nR = MRn OH- H+ 型 体 的 变 化 RH = R- + H+ ?1 ?2 生成不同配比的配合物 例：磺基水杨酸 – Fe 3+ pH = 2 ~ 3 FeR 紫红色 pH = 4 ~ 7 FeR2 橙色 pH = 8 ~ 10 FeR3 黄色 酸度的影响 pH1pHpH2 pH 实际工作中，作 A ~ T 曲线，寻找适宜反应温度. A T A T A T A T 4. 显色时间 T1(℃) T2(℃) t(min) A 实际工作中，作A ~ t 曲线，寻找适宜反应时间. t(min) A Co2＋, Fe3+ Co2+ FeF63- Co(SCN)2 (蓝) NaF SCN－ 例：测Co2＋(含Fe3+) 1)加入配位掩蔽剂或氧化还原掩蔽剂。 例：测Fe3＋ (控制pH) Fe3+, Cu2+ FeSSal （紫红） Cu2+ pH 2.5 SSal 2)选择适当的显色条件以避免干扰。 3)分离干扰离子 可选择适当的光度测量条件（例如适当的波长或参比溶液），消除干扰。 4) 1.无机显色剂：硫氰酸盐、钼酸铵、 过氧化氢等。 2.有机显色剂：种类繁多 偶氮类显色剂：性质稳定、显色反应灵敏度高、选择性好、对比度大，应用最广泛。偶氮胂III、PAR等。 三苯甲烷类：铬天青S、二甲酚橙等 有机显色剂 生色基团：能吸收紫外-可见光的基团。 偶氮基、硫羰基、亚硝基等 助色基团：本身无紫外吸收，但可以使生色团 吸收峰加强同时使吸收峰红移的基团。 胺基、羟基等。 9.4.1 选择适当的入射波长 一般应该选择λmax为入射光波长。 如果λmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。 如图选500nm波长测定，灵敏度虽有所下降，却消除了干扰，提高了测定的准确度和选择性。 为什么需要使用参比溶液？ 测得的的吸光度真正反映待测溶液吸光强度。 选择参比溶液所遵循的一般原则： ⑴ 若仅待测组分与显色剂反应产物在测定