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闫贝贝“三书”
南 阳 理 工 学 院
毕业设计(论文)开题报告
生物与化学工程 学院 生物工程 专业
课题名称:双水相提取芹菜黄酮的工艺研究
学生姓名: 闫贝贝
学 号: 015108020
指导教师: 李继红(副教授)
报告日期: 2012年1月5日
1. 本课题所涉及的问题在国内(外)的研究现状综述
近年来,随着分离提取手段、检测手段的革新和现代药理学的发展,越来越多的生物活性成分被分离提取并检验出其药理学价值,因此对生物活性成分的提取和应用研究成了人们开发利用自然的又一项重要手段,而我国丰富的农产品资源和中医药资源为我们开发利用生物活性成分提供了取之不尽用之不竭的天然宝库。国家中长期科学和技术发展规划纲要(2006~2020年)指出,要重点发展农产品精深加工、产后减损和绿色供应链产业化关键技术,以延长农业产业链,增加农产品附加值,带动农业产业化水平和农业综合效益的全面提高。
本课题主要研究用双水相法精制芹菜中的黄酮,由于传统的有机溶剂萃取法提取黄酮的产率很低而该技术设备简单、在温和条件下进行简单操作就可以获得较高的收率和纯度,因此用此方法萃取有极其重要的研究意义与价值,而且双水相萃取技术越来越受到人们的青睐, 广泛应用于生物、 医学、 环境科学等各大领域 , 近三年来, 双水相萃取技术的应用更加频繁。双水相萃取中使用的双水相是由两种互不相溶的高分子溶液或者互不相溶 的 盐 溶 液 和高 分 子 溶 液 组 成 。最常见的就是聚乙二 醇 (P E G )/ 葡聚 糖 (D extran ) 和 PE G / 无机盐(硫酸盐 、 磷酸盐等)体系, 其次是聚合 物/低分子量组分 、 离 子 液体体系和高分子电解质/高分子表面活性剂体系。本实验采取PEG/无机盐(磷酸盐、硫酸盐)体系来精制黄酮。
黄酮类化合物是一组在自然界中分布广泛,具有多种生物活性的天然产物,黄酮类化合物的分离分析对医药及食品工业是非常重要的,双水相萃取技术作为一种新型的萃取分离技术在黄酮类化合物的分离分析中对得到了应用。黄芩苷是黄芩的主要有效成分,具有抗炎、抗菌、解热、降压、利尿、利胆、保肝以及调节免疫等作用。葛根素具有扩张冠状动脉、降低血压、抗心律失常、改善微循环、降血糖等功效,是重要的心脑血管用药。银杏黄酮有强烈的清除细胞内自由基的作用,能降低细胞的氧化代谢,对脑和四肢动脉血流失调引起的一系列心脑血管疾病有明显和独特的疗效。柿叶黄酮具有清热解毒、清血利尿、抑菌、止血、降低胆固醇、抑制癌细胞生长等生理功能。这些黄酮类化合物近年来都经双水相萃取技术得到了很好的分离测定。芹菜属伞形花科一年生或两年生草本植物,是一种丰富的自然资源。芹菜中含有以芹菜素为主的黄酮类化合物,具有降压安神、降血脂、保护血管、增强机体免疫力、抗氧化、抗衰老等功能,以及广泛的生物活性及药用价值。作为天然抗氧化剂,黄酮类化合物一直受到人们的关注,因次研究提取和测定芹菜内的黄酮类物质,具有一定的使用价值。本实验以芹菜叶为原料,针对芹菜叶的生理特点,采用有机溶剂恒温振荡法提取和分光光度计测定的方法粗提黄酮,然后用双水相技术精制黄酮进行研究。 2. 本人对课题任务书提出的任务要求及实现预期目标的可行性分析
经过李老师的认真讲解和大量文献资料的查阅,本人认为本课题任务书提出的要求明确,可以实现预期目标,具体分析如下:
① 经过大量文献的查阅,我们决定先采用传统的有机溶剂萃取法,即本实验采用乙醇浸取恒温振荡粗提芹菜中的黄酮,再用聚乙二醇和相应盐类形成的双水相系进行黄酮粗提液的精制。
②整个实验所需要的仪器不多,主要是超净工作台、分光光度计、恒温水浴锅、精密电动搅拌器、离心机、电子天平等常用的实验设备,所需的试剂与耗材的费用在毕业论文实验经费之内。
③整个实验工作量适中,两个月内能够完成。
④通过将近四年专业知识的学习,掌握了过硬的专业研究知识,掌握了怎样查阅资料,思考问题以及探究问题解决问题的能力和技巧。
综上所述,我认为本课题实验方案科学合理,所涉及的理论在我的知识范围之内,工作量适中,实验条件和实验经费达得到,在老师的指导下,只要我认真努力,就一定能取得成功。 3.本课题需要重点研究的、关键的问题及解决的思路
①材料的处理是一个非常关键的问题,需要考虑最终提取的性质,材料主要物质在提取目标物的过程中可能发生的变化以及对提取物、实验效果的影响,采用恰当的处理方法。比如芹菜叶其实比芹菜杆含有更多的营养,黄酮含量也较高,因此本实验采用芹菜叶作为实验材料。
②在得到芹菜黄酮粗提液一定的情况下,先测一下黄酮的量,然后用双水相法在进行精制,所用的聚乙二醇、磷酸盐类及它们的浓度、
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