@第2节有关色谱保留的基本术语及参数概述.pptVIP

第二章 色谱法的基本术语及理论 主要内容 主要内容 1、保留时间和保留体积 保留时间（retention time，以tR表示）： 1、保留时间和保留体积 保留体积（retention volume，以VR表示）：从进样到柱后出现浓度最大值所需消耗的流动相的体积，一般以 ml 为单位。 保留体积可用保留时间乘以流动相的流速求得。其公式如下： 2、死时间和死体积 死时间（dead time，以tM表示）： 2、死时间和死体积 2、死时间和死体积 GC中tM的准确求算方法 HPLC中tM的准确求算方法 （1）由色谱柱的结构参数进行计算 HPLC中tM的准确求算方法 （2）由色谱柱的操作参数进行计算 HPLC中tM的准确求算方法 （3）依据经验公式计算 当从进样阀到检测器的连接管路的内部体积足够小时，tM可按下述公式计算： 2、死时间和死体积 死体积（dead volume，以VM表示） 不保留物质从进样到柱后出现浓度最大值所需消耗的流动相的体积，等于死时间乘以流动相的流速。 死体积包括进样器至色谱柱管路的空间、固定相颗粒间隙、柱出口管路及检测器内腔空间的总和。 3、调整保留时间和调整保留体积 调整保留时间（adjusted retention time，以 表示）：保留时间扣除死时间后的保留值，其公式如下： 3、调整保留时间和调整保留体积 调整保留体积（adjusted retention volume，以V′表示）：或称校正保留体积，即保留体积扣除死体积后的保留值，其公式如下： 4、相对保留值 相对保留值（relative retention，以ri,s 表示）又称分离因子（separation factor）、分配系数比或容量因子比，即在一定色谱条件下，被测组分的调整保留时间t′R与标准物的调整保留时间t R(s)之比。 4、相对保留值 其公式如下： 4、相对保留值 采用相对保留值，是为了消除某些操作条件，如流速和固定液流失等对保留值的影响。 相对保留值中标准物可以是被测样品中的某一组分，也可以是人为地加入的某一化合物。 γ1,仅为柱温、固定液性质的函数，而与其他实验条件无关。 γ1,作为定性指标的缺点是标准物不统一，其数值随标准物的不同而不同。 5、保留指数 鉴于相对保留值存在标准物不统一，测量精度不够高等问题，Kovats提出以保留指数来评价被测物的色谱保留强弱。 保留指数（retention index，以 I 表示），又称为柯瓦指数（Kovats index），是使用最广泛，并得到国际公认的定性指标。它具有重现性好（精度可达 ± 0.1指数单位），标准物统一及温度系数小等优点。 5、保留指数 以一系列正构烷烃为基准物，被测物的保留指数 I 可用内插法算出。 保留指数的公式来源 内插法的理论基础为：正构烷烃调整保留时间的对数（lg t′R ）与其相应的碳数呈线性关系。 lg t′R = a·nc+ b 式中，nc为碳数。 5、保留指数 保留指数的计算统一用正构烷烃系列化合物作为标准物，规定在任何色谱条件下正构烷烃的保留指数均为100N（N为正构烷烃的碳数），而被测物的保留指数以下式计算： 5、保留指数 当相邻两个正构烷烃的碳数差值 N = 1 时，可简化为 ： 保留指数的特点 保留指数仅与固定相的性质及柱温有关，与其它实验条件无关，因此定性准确度比 tR 等保留值准确。习惯上将测定时的柱温写在符号 I 的下角，所用固定相写在符号 I 的上角。如 ，即采用SE-30为固定相，柱温在 150℃进行测试所得的保留指数。 同系物的保留指数与碳数呈线性关系。同系物中，相同的取代基有相同的保留指数增量。 6、保留值与容量因子及分配系数的关系 可见容量因子k大的组分保留时间长。 6、保留值与容量因子及分配系数的关系 在某色谱系统中，系统的死时间为1.5min，某样品组分在该系统中的容量因子为5，问该组分进样后需多长时间可出峰？ 解： 6、保留值与容量因子及分配系数的关系 分配系数 K 越大，则保留值 tR 越大； 在相同的色谱条件下，如果两组分的 K 值相同，则色谱峰重合； K 值差别越大，色谱峰分离度就越大。 主要内容 主要内容 例 （1）保留值与分配系数的关系 色谱分离的前提 各组分分配系数 K 或容量因子 k 不等是分离的前提。选择合适分离条件使得难分离的组分 K 不等而分离。组分一定时，改变流动相、固定相和温度，可改变 K。 结论 第一节 色谱分离与保留作用 第二节 有关色谱保留的基本术语及参数 第三节 塔板理论 第四节 速率理论 第五节 色谱峰展宽的柱外因素 第六节 分离度及影响因素 第七节 系统适应性试验 第八节