第六章基因工程原理
第二章 基因工程中的工具酶 限制性内切酶—主要用于DNA分子的特异切割 DNA甲基化酶—用于DNA分子的甲基化 核酸酶—用于DNA和RNA的非特异性切割 核酸聚合酶—用于DNA和RNA的合成 核酸连接酶—用于DNA和RNA的连接 核酸末端修饰酶—用于DNA和RNA的末端修饰 其它酶类--用于生物细胞的破壁,转化,核酸纯化,检测等 一、限制性内切酶 (一)、限制修饰系统的种类 1.?I型:由三个基因构成,hsdR;hsdM;hsdS位于染色体上,三个基因构成一个复合体,能识别专一的核苷酸顺序,并在识别点附近切割双链,但切割序列没有专一性。 2.?II型:限制与修饰基因产物独立起作用,识别位点(回文序列)严格专一,并在识别位点内将双链切断 3.?III型:hsdM与hsdS基因产物结合成一亚单位,识别位点严格专一(不是回文序列),但切点不专一,往往不在识别位点内部 (二)、限制性内切酶的定义、命名 1. 定义:广义指上述三个系统中的限制酶; 狭义指II型限制酶。 2. 命名:取属名的第一个字母大写,取种名的前两个字母小写,构成基本名称。该种中发现的不同的酶按照顺序编号I, II, III等。。 例如:HindⅢ前三个字母来自于菌种名称Haemophilus influenzae,“d”表示菌系为d型血清型;“Ⅲ”表示分离到的第三个限制酶。 若酶
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