生化大實验指导书.docVIP

《生物化学大实验》 参考资料 《生物化学综合大实验》课程组 2014年12月 资料来源：1、张龙翔 张庭芳 李令媛.《生化实验方法和技术》,1997年，第2版； ※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※ 实验一 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 ——蛋白质分子量的测定 试剂配制 1、凝胶贮液： Acr 29g ，Bis 1g，加水至100ml，即为浓度30%的凝胶贮液。 2、10% 过硫酸铵 过硫酸铵1g，加水至10ml。 SDS 100mg 巯基乙醇 0.1mL 甘油 1mL 溴酚蓝 2mg pH 7.2磷酸盐缓冲溶液 0.5mL 加蒸馏水至总体积10mL 4、4X分离胶buffer Tris 36.3g, HCl 调pH 到8.8，然后加入SDS 0.8g, 加水至200ml。 5、4X浓缩胶buffer Tris 3.0g，HCl 调pH 到6.8，然后加入SDS 0.2g, 加水至50ml。 6、电泳buffer Tris 30.28g Gly 144.13g SDS 10g 加