钱洁.ppt

爆压法对马钱子生物碱的含量及药效的影响 姓名：钱洁 指导老师：肖若蕾 前言 马钱子为马前科马前或云南马前的干燥成熟种子，其味苦、性寒，有大毒。具有通络止痛、散结消肿、抗肿瘤等作用,是中医常用药物,但为大毒之品，其主要毒性成分是士的宁和马钱子碱。本文通过对马钱子生品和爆压品总生物碱的提取及定性分析,以及爆压品与生品急性毒性试验的对比研究,探讨了爆压法炮制马钱子的可行性。 本课题包括以下四部分内容： ◆制备样品，包括马钱子生品和爆压品 ◆提取马钱子生品和爆压品的总生物碱，然后分别测定两种生物碱——士的宁和马钱子碱的含量 ◆对马钱子生品和爆压品进行急性毒性试验 ◆小结与讨论 一、样的炮制品 ◆生品 取净马钱子用铡刀切薄片,80 ℃烘干后取出。 ◆爆压品 取生马钱子,检出杂质,适量放入爆米花机内(1/ 2 容 量) ,以中火加热,缓慢匀速地旋转爆米花机( 15 转/ min) , 加热5min , 待气压表指针到152KPa 时将马钱子快速减压爆出,冷却后撞去绒毛即可。 三、急性毒性试验 马钱子生品、爆压品煎煮液均取体重(20±2)g小鼠120只,雌雄各半,随机分成6 组,通过预试找出最大致死量(生品为0.166g/kg,爆压品为0.22g/kg),按1∶0.8 比例用生理盐水等比稀释,分别给 6 组小鼠于上午8时1次灌胃给药,药容量为0.2ml/10g,然后连续观察7天,记录逐日的小鼠毒性反应及死亡数,结果见表3、4和表5 四、小结与讨论 ◆提取生品和炮制品中的总生物碱后用薄层层析的方法进行生物碱种类鉴别,比较爆压法和生品的差异,能够避免杂质的干扰,与标准品对照斑点判断较清晰。 ◆从图1可以直观看出爆压法中马钱子碱的斑点明显比生品小,而士的宁的斑点与生品比较缩小不明显。说明士的宁的含量比马钱子碱变化小,而马钱子碱的含量下降明显, 说明爆压法主要通过降低马钱子碱的含量来降低毒性。 小结与讨论 ◆本实验采用爆压法对马钱子炮制后急性毒性比生品下降了38.3%。但其总生物碱含量下降甚微,与生品比较仍高达92%,损失率只有8%,说明通过爆压法后马钱子中减少的士的宁和马钱子碱并没有被全部破坏丢失,而有可能大部分转化成毒性较低的其它生物碱,这就确保了马钱子的效价不会明显降低。 * 氨性氯仿提取 15.76 7.08 水提取 18.83 9.27 酸水提取 20.55 10.43 提取方式 士的宁含量/mg·g﹣1 马钱子碱的含量/mg·g﹣1 二、总生物碱的提取及测定 ◆提取 包括三种方法：氨性氯仿提取、水提取和酸水提取。 表1不同方法提取马钱子碱和士的宁的含量 从上表可以看出，采用酸水提取法明显优于其他方法。 表2 马钱子不同炮制品中总生物碱得率 生品 100.00 2.4583 2.46 100 爆压 100.00 2.2675 2.27 92.3 炮制方法 原药量（g） 总碱量（g） 得率（%） 与生品比较率（%） 用酸水提取法提取马钱子生品和爆压品得到总生物碱的含量如表2： 由此表可以看出爆压法炮制后马钱子总生物碱的含量降低了 1马钱子生品　2对照品　3 爆压品　A:士的宁　B :马钱子碱 ◆含量测定 用薄层层析法测得马钱子生品对照品和爆压品得到的色谱图如下： 从马钱子生品、爆压品的薄层层析图谱来看,爆压品与生品比较，成分基本一致，仅存在含量的差异，士的宁的含量无明显变化，而马钱子碱的含量明显下降了。 表3 马钱子生品对小鼠急毒的影响（n=20） 1 20 0.166 -0.78 18 0.9 2 20 0.133 -0.88 15 0.